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1高盐和温度对凡纳滨对虾受精卵孵化及幼体发育的影响 实验以凡纳滨对虾受精卵和各期幼体为试验材料,探讨了高盐和温度对受精卵孵化和幼体发育的影响,以及各期幼体对高盐的耐受性。结果表明,高盐胁迫和温度显著影响受精卵的孵化率、初孵时间和集中孵化时间(P<0.05)。随盐度和温度升高,平均孵化率呈先升高后降低的变化趋势,盐度30和温度32℃时孵化率最高。盐度由33升至36时孵化率由74.67%下降到50.79%,盐度39时孵化率仅为3.42%,盐度42无节幼体孵出。受精卵最早可在7.5h左右完成幼体破膜孵化。同一温度下,初孵时间随盐度的升高而延长。盐度27-33和温度30-33℃时,受精卵集中于胚胎发育后的7.5-11.5h完成孵化,时间最短;溞状幼体对高盐胁迫的耐受性随变态发育逐渐提高,表现为Z3>Z2>Z1;糠虾各期幼体及仔虾P1-P3间耐盐性均无显著差异(P>0.05)。此外,幼体的发育指数也随盐度升高而下降,盐度越高,幼体发育越慢。结果说明,高盐和低温会抑制凡纳滨对虾受精卵孵化和幼体变态,受精卵孵化的盐度上限在39-42之间。 2高盐对凡纳滨对虾仔虾生长、渗透调节及免疫相关酶活力的影响 为探讨高盐条件下凡纳滨对虾仔虾的耐盐性和免疫响应,进行了为期30d的生长实验。设置4个盐度梯度(40、50、60、65),以盐度30为对照,称量实验起始和结束时仔虾的体质量,计算日增重量,实验结束时检测体内总ATPase、Na+-K+-ATPase、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)和丙二醛(MDA)活力。结果表明,高盐能显著抑制凡纳滨对虾仔虾的日增重量(P<0.05),盐度40、50、60、65平均日增重分别为对照组的84.53%、60.99%、46.19%、27.71%;随着盐度的升高,仔虾体内Na+-K+-ATPase活力缓慢升高,盐度60后趋于稳定。总ATP酶活力表现出先小幅下降后稳定的趋势,最终维持在1.4U/mgprot左右。T-SOD和CAT活力随盐度升高均呈现出先升高后降低的趋势,盐度50时达到峰值;ACP和AKP活力随盐度升高呈上升趋势,不同盐度间差异显著(P<0.05)。此外,盐度显著影响凡纳滨对虾仔虾的MDA含量(P<0.05),对LZM含量无显著影响(P>0.05)。结果说明,盐度越高,仔虾生长越缓慢,用于渗透调节的能量增加。在一定的盐度范围内,高盐能激发仔虾机体部分非特异性免疫酶活力以适应高盐胁迫。 3盐化幅度、速度及方式对凡纳滨对虾仔虾生长和存活率的影响 为探讨凡纳滨对虾苗种盐化标粗的最适盐化幅度、盐化速度和盐化方式,丰富凡纳滨对虾高盐环境抗逆性研究,为凡纳滨对虾苗种的盐化标粗生产实践提供理论支持。本文研究了不同盐化幅度(3/d、6/d、9/d、12/d、15/d)、盐化速度(1h/次、3h/次、6h/次、12h/次、18h/次)和盐化方式(前期盐化、中期盐化、后期盐化、间隔盐化)与凡纳滨对虾仔虾生长发育、活力和存活率的关系。结果表明:不同盐化幅度、盐化速度和盐化方式均显著影响盐化标粗过程中仔虾的生长发育、活力和存活率(P<0.05)。综合考虑生长性能、苗种活力和存活率等因素,最适盐化幅度为3d-6/d,此盐化幅度范围内,仔虾存活率可达到74.07%-78.83%;盐化幅度超过9/d时,仔虾存活率显著下降(P<0.05),其中盐化幅度达到15/d时,孵化率仅为43.37%。过快的盐化速度导致死亡率和活力显著下降,盐化速度快于1h/次时,仔虾死亡率接近50%;随盐化速度的放缓,仔虾生长速度加快,盐化速度为6h/次-18h/次时,生长速度维持稳定,日增重量1.48mg-1.51mg。盐化方式方面,后期盐化和间隔盐化苗种的质量和存活率等优于前期盐化和中期盐化,仔虾活力表现为:间隔盐化>后期盐化>中期盐化>前期盐化。综合考虑,最适盐化幅度为3d-6/d,6h/次-12h/次的仔虾盐化速度为最佳;后期盐化和间隔盐化更有助于仔虾保持较好活力和较高存活率。 4凡纳滨对虾工厂化虾苗盐化和标粗技术 为更进一步验证凡纳滨对虾仔虾最适盐化幅度、速度及方式的相关研究结果,本实验在传统工厂化虾苗盐化和标粗方法的基础上,结合论文中关于仔虾盐化的相关理论研究,总结和优化了凡纳滨对虾工厂化虾苗盐化和标粗方法,并在苗种生产企业付诸实施,效果良好。此方法不仅可为凡纳滨对虾耐高盐苗种生产提供理论支持,也可帮助渔民实现增产增收的目标。