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目的：通过建立高催乳素血症模型动物卵巢颗粒细胞培养方法,探索以肝脾为核心干预高催乳素血症模型动物离体卵巢颗粒细胞凋亡机制。方法：腹腔注射甲氧氯普胺,制作高催乳素血症大鼠模型。随机分成六组：空白对照组、阴性对照组、溴隐亭组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。造模成功后,溴隐亭组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,均连续给药30天,用酶联免疫法测血清泌乳素；用机械分离方法进行卵巢卵泡颗粒细胞的提取,离体原代培养；用HE染色及FSHR细胞免疫荧光染色鉴定细胞；采用MTT检测细胞存活率及各组细胞培养24h、48h、72h、96h细胞增殖情况；采用流式细胞仪分析细胞周期各时相的变化及细胞凋亡指数。结果：经HE染色和FSHR细胞免疫荧光染色鉴定为大鼠卵巢颗粒细胞,且细胞纯度>90%。MTT检测细胞存活率结果显示,与空白对照组比较,模型对照组明显降低(P<0.01),溴隐亭组、中药低剂量组降低(P<0.05)；与模型对照组比较,中药高剂量组升高(P<0.05)；MTT检测显示24h、48h各组细胞0D值无明显差异性(P>0.05),72h、96h各组细胞0D值有显著差异性(P<0.01)：说明用药组间存在明显量效和时效关系。中药高剂量组能使S期的细胞增殖显著增多,G0/G1期细胞相对比例减少(P<0.05),其中逍遥散加减方高剂量组与溴隐亭组比较无差异性(P>0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡指数结果显示：与空白对照组比较,模型对照组、中药低剂量组明显升高,有显著差异性(P<0.01),溴隐亭组上升有差异性(P<0.05)；与模型对照组比较,中药高剂量组下降(P<0.05)；与中药高剂量组比较,中药低剂量组升高(P<0.05),说明组内存在量效关系。结论：通过机械分离、差速贴壁法,HE染色及FSHR细胞免疫荧光染色鉴定方法获取的HPRL模型大鼠卵巢颗粒细胞的活力高,形成HPRL模型大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养体系。以肝脾为核心的治疗方法能提高模型动物的卵巢颗粒细胞存活率;对体外培养颗粒细胞24、48h细胞增殖影响不明显,72h给药组细胞显著增殖,96h细胞增殖减少,说明各用药组间存在量效关系与时效关系。流式细胞仪检测细胞周期结果显示：逍遥散加减方作用于体外培养的颗粒细胞能使S期的细胞比例增多,说明逍遥散加减方能通过减少G。／G1期细胞阻滞,促进细胞由静止期向S期转化、加速细胞周期的进程,增加S期细胞比例,从而促进颗粒细胞的增殖及其DNA的合成,恢复卵巢功能。从颗粒细胞的凋亡指数分析,该法能降低模型动物卵巢颗粒细胞的凋亡指数,进一步说明该法是通过抑制卵巢颗粒细胞凋亡,减少卵泡闭锁,改善卵巢功能。