【摘 要】
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目的研究慢性高糖对体外培养的足细胞表达结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)及其受体-低密度脂蛋白受体相关蛋白(lowdensitylipoproteinreceptor-relatedp
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目的研究慢性高糖对体外培养的足细胞表达结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)及其受体-低密度脂蛋白受体相关蛋白(lowdensitylipoproteinreceptor-relatedprotein,LRP)的影响以及可能涉及的信号途径。方法以体外培养的小鼠肾小球足细胞为研究对象,应用免疫荧光染色技术检测CTGF在足细胞中的分布,Western印迹分析技术检测高糖刺激不同时间对足细胞表达CTGF蛋白的影响。进一步观察高糖对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPKS)信号途径活化的影响以及MAPKS信号途径在高糖调节足细胞表达CTGF中的作用。同时检测高糖对足细胞表达CTGF的受体-LRP蛋白的影响。结果体外培养足细胞表达基础水平的CTGF蛋白,并且主要定位于足细胞胞浆,高糖刺激2天足细胞表达CTGF水平开始升高,4天达高峰(P<0.05),6天下降,8天降至对照组水平;高糖可以活化足细胞细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-relatedkinase,ERK1/2),于刺激30min时ERK1/2即开始活化,6h达高峰,持续至24h,48h接近基础水平。正常糖和甘露醇在各个时间点均不活化ERK1/2。应用ERK1/2活化特异抑制剂PD98059可以消减高糖刺激CT-GF表达增加的效应。在各个时间点,高糖环境对足细胞表达CTGF的受体-LRP蛋白没有明显影响。结论①本研究发现在体外培养小鼠肾脏足细胞表达基础水平的CT-GF蛋白,并且主要定位于足细胞胞浆。②短期(2-4天)高糖通过活化ERK1/2信号通路刺激足细胞CTGF的表达,高糖继续培养(6-8天)对足细胞内的CTGF蛋白表达水平没有影响。③慢性环境高糖对足细胞上CTGF的受体蛋白-LRP表达无影响。
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