慢性乙型肝炎患者前S1抗原与乙肝病毒感染外周单个核细胞的关系及对免疫功能的影响

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目的通过以慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)患者为研究对象,检测分析血清前S1(preliminary-s1,Pre-S1)抗原与血清中乙肝病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B vivas-deoxyribonudeic acid,HBV-DNA)及与外周单个核细胞(peripheral blood monouclear cells,PBMC)中HBV-DNA它们之间的相关性,旨在寻找有助于评判反应乙肝病毒(hepatitis B rivas,HBV)在机体免疫细胞中复制程度的指标;进一步通过对CD4+、CD8+T亚群的数量的检测,观察机体免疫损伤的程度,以评价Pre-S1抗原检测反应HBV在机体免疫细胞内复制及造成免疫损伤的临床应用价值。方法随机选取于2008年3月至8月,在宁夏医科大学附属医院感染疾病科门诊及住院部治疗的CHB患者108例,及门诊体检健康对照者30例,分离出血清及PBMC备用。用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunsorben tassay,ELISA)检测108例CHB患者血清Pre-S1抗原,用荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quqntity polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术检测血清和PBMC中的HBV-DNA,同时采用流式细胞仪技术(f1ow cytometry,FCM)检测所有受检患者及健康对照者T细胞亚群情况后,做统计学分析。结果1.Pre-S1抗原反应HBV复制的诊断敏感度89.7%、准确性91.7%均优于乙肝e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)。2.Pre-S1抗原阳性率与血清和PBMC中HBV-DNA均存在关联(X2血清=75.19,X2PBMC=47.79,P<0.01,r血清=0.96,rPBMC=0.98),且随HBV-DNA含量的增加而增加。3.CHB患者组较正常健康对照组比较CD3+(T=3.25,P=0.024)、CD4+(T=3.05,P=0.038)T细胞百分率及CD4+/CD8+比值(T=3.94,P=0.017)明显降低,CD8+T细胞百分率较健康组明显升高(T=-3.7,P=0.021)。4.Pre-S1抗原阳性组较阴性组CD3+(T=2.7,P=0.04)、CD4+(T=-2.4,P=0.02)T细胞百分率、CD4+/CD8+比值(T=3.4,P=0.02)明显下降,CD8+T细胞百分率(T=2.9,P=0.04)明显升高。5.PBMC中HBV-DNA阳性组与HBV-DNA阴性组比较,CD4+T细胞百分比(T=-2.5,P=0.04),CD4/CD8比值明显降低(T=3.12,P=0.03),CD8+T细胞百分比明显升高(T=3.8,P=0.01),CD3+T细胞(T=4.5,P=0.07)无明显差异。6.PBMC中HBV-DNA的量与CD3+、CD4+均有负相关关系(r分别为-0.63、-0.51)(P<0.01),HBV-DNA的载量与CD8+有正相关关系(r=0.61)(P<0.01)。结论1.Pre-S1抗原反应HBV复制的的检验效能优于HBeAg。2.血清Pre-S1抗原与血清HBV-DNA及PBMC中HBV-DNA的存在和复制密切相关,Pre-S1可反映HBV在机体免疫细胞中复制的程度,反应机体免疫损伤的情况。3.慢性乙肝患者人体内发生T细胞免疫紊乱,HBV感染PBMC后,随着PBMC内HBV-DNA复制增加,可进一步加重T细胞功能的紊乱,影响其免疫功能。所以HBV可感染PBMC,Pre-S1抗原检测可以反映CHB患者细胞免疫损伤程度,可作为诊断乙型肝炎、反应HBV复制及感染PBMC的一个敏感指标,慢性乙肝患者Pre-S1抗原、血清和PBMC中HBV-DNA的联合检测可对于乙肝患者的病情判断、临床治疗的评价提供可靠依据。
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