HGF在大鼠脑出血后保护作用及其机制的研究

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目的:研究HGF在脑出血后血肿周边带的表达,及其对出血灶微血管的再生和神经元凋亡以及对脑出血病程后期学习和记忆功能的影响。方法:1.健康雄性SD大鼠30只,随机分为6组,脑出血组:分别为脑出血后6h、24h、3d、7d、14d;生理盐水组为对照。观察大鼠神经功能缺损评分的改变,于相应时间点处死动物,应用HE染色及免疫组织化学法观察脑组织中HGF的表达。2.构建SD大鼠脑出血模型,随机分为模型组,NS干预组和HGF干预组,每组根据随机分为6h、24h、3d、7d、14d、28d六个亚组。HGF干预组大鼠用微量注射器向侧脑室内注入HGF15μl,NS干预组侧脑室注入15μl生理盐水。单取所有28d亚组进行Morris水迷宫实验,其余各亚组于各观察时间点处死大鼠取脑组织制切片,应用免疫组化法和TUNEL染色法分别进行Ⅷ因子及凋亡细胞检测。结果:1.大鼠脑出血模型制作6小时后,开始出现HGF表达,3天时明显增多,7天时密集表达,之后缓慢下降,至2周仍有表达。各时间点HGF的表达主要集中在血肿周边带。2.Ⅷ因子免疫组化结果:(1)Ⅷ因子阳性细胞于脑出血后6h表达增多,并随时间延长表达逐渐上升,7d时表达达高峰,14d时表达较7d有所降低,出血后24h、3d、7d、14d组与假手术对照组比较,统计学上有显著性差异(P<0.01)。(2)HGF组Ⅷ因子阳性细胞数与NS干预组和模型组比较,统计学上有显著差异(P<0.05),NS干预组和模型组比较,统计学上无显著性差异(P>0.05)。3.TUNEL染色结果:实验各组均有阳性细胞表达,各时间点,HGF干预组凋亡细胞数与NS干预组及模型组比较显著减少,统计学上有显著性差异(P<0.05)。4.水迷宫实验结果:28d-HGF干预组在第6天实验中,大鼠的逃避潜伏期分布(26.52±2.932s,n=4),与28d NS干预组及28d-模型组比较,统计学上有显著性差异(P<0.05)。结论:1.脑出血后可上调HGF在大脑的表达;2. HGF可促进脑出血后微血管重建;3.HGF具有抑制脑出血后神经元凋亡的作用;4.经HGF干预后,脑出血病程后期的学习、记忆功能得到改善。
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