目的:探讨非催化区域酪氨酸激酶衔接蛋白1(Nck1)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)的血管生成中的作用及其分子机制。方法:采用免疫组织化学和免疫印迹法分别检测CSCC标本和癌细胞中蛋白的表达。用CD34内皮标记结合Weinner计数法检测癌组织微血管密度(MVD)。用实时定量PCR检测癌细胞mRNA水平。分别通过表达质粒pCMV2-Nck1和Nck1-siRNA转染子宫颈鳞癌细胞获得Nck1基因过表达(SiHa-Nck1+)和基因沉默(SiHa-Nck1-)的细胞株。利用ELISA检测细胞上清液蛋白质水平。分别通过CCK-8细胞活力测定,transwell小室细胞迁移实验和体外Matrigel管腔实验分别检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖、迁移和管腔形成能力。结果:Nck1的表达水平在正常宫颈上皮组织和低级别宫颈上皮内瘤变至高级别宫颈上皮内瘤变中逐渐升高。在宫颈鳞癌组织中Nck1的表达水平显著高于高级别上皮内瘤变,且Nck1的表达与宫颈鳞癌微血管密度正相关。与正常SiHa上清液处理后的HUVECs相比,SiHa-Nck1+上清液处理后的内皮细胞的增殖能力、迁移能力和管腔形成能力显着增强,而SiHa-Nck1-上清液处理后的HUVECs分别表现出显著降低的增殖、迁移和管腔形成能力。Nck1基因转染和siRNA分别导致SiHa中Rac1-GTP、p-PAK1和MMP2表达水平的上调和下降,而利用Rac1抑制剂(NSC23766)预处理降低SiHa-Nck1+中Rac1-GTP的同时,p-PAK1和MMP2的水平也显著降低。并且在SiHa-Nck1+中利用PAK1抑制剂抑制PAK1的活化时,MMP2的水平也显著降低,而Rac1-GTP的水平却没有明显改变。此外,当SiHa细胞的Rac1或PAK1的活性受到抑制时,其上清液处理下的HUVECs也相应地表现出较低的增殖、迁移和管腔形成能力。结论:Nck1高表达于宫颈鳞癌,促进宫颈鳞癌的微血管生成,其分子机制与Nck1激活Rac1/PAK1/MMP2信号通路有关。