胰腺癌是恶性程度最高的肿瘤之一，其死亡和和发病比约为0.99：l。胰腺癌早期症状隐匿而缺乏特异性，临床表现不一，给正确诊断带来困难。手术切除肿瘤可改善Ⅰ、Ⅱ期患者的生存状况，然而大部分患者就诊时已经接近晚期，常伴有转移、肿瘤浸润周围血管和(或)累及小肠、结肠系膜。近年来放疗和化疗方面的发展也在一定程度上提高了胰腺癌患者的生存质量和时间，但总的来说胰腺癌的5年存活率仅3％～4％。目前研究中较肯定与胰腺癌发病有关的原癌基因主要有k-ms、c-myc、c-erbB-2等，抑癌基因有p53、DPC4、p16等；胰腺癌相关的多肽生长因子及其受体有TGF-β／T β R、EGF／EGFR、PDGF、IGF-Ⅰ、FGF等，这些研究不仅使我认识到胰腺癌发病的微观机制，而且为胰腺癌的早期诊断和治疗提供新的依据。在此基础上，我们希望通过进一步探讨胰腺癌发生发展及预后相关的新基因，研究其在胰腺癌中的作用和变化，探索胰腺癌新的分子诊断、基因治疗和预后分析指标。 多梳基因(polycomb group genes，PcG)通过调节染色质的改造在基因表达中发挥关键作用，充当转录抑制物并与正常干细胞功能和癌干细胞有关。PcG基因的异常表达导致细胞增殖，肿瘤形成。Bmi-l基因(Bcell-specific MLVintegration site-1)属于多梳基因家族，是一种转录抑制因子，其最初发现是作为一种原癌基因与另一种癌基因c-myc共同导致B细胞非霍奇金淋巴瘤的发病。人类。Bmi-1基因克隆和定位在10号染色体短臂13区，在非霍奇金淋巴瘤和实体瘤中该区域成扩增状态。Bmi-1含有一个环指模序，位于N-末端的环指结构域(ring finger domain，RF)，在细胞增值和肿瘤形成中发挥重要作用；还含有一个位于中心的保守DNA结合模序螺旋-转角-螺旋-转角(DNA banding helix-tum-helix-turn motif，H-T-H-T)，在转录抑制中起重要作用。Bmi-1与哺乳动物的骨骼、造血及神经发育密切相关，在干细胞，包括正常及恶性造血干细胞自我更新能力的维持上具有重要意义，然而Bmi-l在乳腺上皮细胞的过度表达可激活端粒酶活性导致上皮细胞无限增殖。目前研究已证实，Bmi-1在多种人类恶性肿瘤中高表达，包括被套细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、B细胞非何杰金淋巴瘤、乳腺癌、前列腺癌和结肠癌，其表达与肿瘤发生发展有关。Song等研究证实Bmi-1的表达水平与鼻咽癌发生、发展和转移密切相关，过度表达提示患者预后不良。最近的一项研究也表明，Bmi-1是一个肿瘤相关抗原，可作为肿瘤基因治疗的潜在靶点。因此，Bmi-1基因表达异常有助于监测肿瘤细胞突变，对于恶性肿瘤的诊断和预后具有重要价值。 第一章Bmi-1在胰腺癌组织中的表达 (一)研究材料和方法 收集2002年1月至2006年12月间中山大学附属第二医院保存具有完整病例资料的胰腺癌病理标本81例。所有病例均经术后组织病理学确诊，且不合并其他系统肿瘤性疾病。所有组织标本均经10％甲醛固定，石蜡包埋。 用S-P免疫组化方法检测胰腺癌组织是否存在Bmi-1蛋白的表达。Fisher精确概率检验分析导管腺癌及其他组织学亚型之间Bmi-1阳性率的差异，α=0.05.所有统计学分析均在SPSS 13.0下运行。 (二)结果 胰腺癌组织存在Bmi-1蛋白的过度表达，本组病例Bmi-1阳性率为75.3％(61／81)，以核阳性为主，表现为大部分肿瘤细胞及少量淋巴细胞黄褐色颗粒。Bmi-1在不同病理类型胰腺癌组织中的阳性表达率分别为：低分化导管腺癌87.5％(7／8)；中分化导管腺癌82.1％(23／28)；高分化导管腺癌69.4％(25／36)； 未分化癌100％(2／2)；腺鳞癌75％(3／4)；其他类型33.3％(1／3)。导管腺癌的组织学亚型间Bmi-1表达阳性率比较无显著性差异(P>0.05)。 (三)结论 胰腺癌组织存在Bmi-1蛋白的过度表达，本组病例Bmi-1阳性率为75.3％(61／81)，以核阳性为主。Bmi-1蛋白表达的阳性率与胰腺癌不同病理类型无无显著性差异(P>0.05)。 第二章Bmi-1过度表达与胰腺癌病人临床病理特征及预后之间的关系 (一)研究材料和方法 研究材料：收集整理上述2002年1月至2006年12月问中山大学附属第二医院胰腺癌病理标本相应的临床资料，并进行了为期3年随访，利用SAS 8.1建立临床资料数据库。患者的临床资料收集于病案室档案库，包括年龄、肿瘤大小、临床分期等。所有病例均取得病人家属的知情同意。 研究方法：参照WHO胰腺外分泌肿瘤组织学分类方法，由三位不同的病理专家进行重新诊断，所有过程均在双盲下进行。临床分期参照UICC胰腺外分泌肿瘤TNM分类进行划分。所得病人的临床病理资料参数与Bmi-1表达阳性率的比较使用x2检验。生存分析应用Kaplan-Meier方法比较不同临床病理因素对生存率的影响，生存期差别的比较应用Log-Rank时序检验。所有统计分析均在SPSS 13.0统计软件包中完成，检验水平α=0.05。 (二)结果 Bmi-1的强阳性表达率在肿瘤体积(≤3cm vs．>3cm，P=0.033)、浸润深度(T1～T4，P=0.006)、临床分期(Ⅰ／Ⅱ vs．Ⅲ／Ⅳ，P=0.006)、淋巴结转移(有VS．无，P=0.000)等临床病理因素界限问存在显著性差异(P<0.05)。而Bmi-1强阳性表达率与患者性别、年龄、组织亚型问无显著性差异(p>0.05)。Bmi-1阳性患者生存率明显低于Bmi-l阴性患者(x2=4.094，P<0.05)。 (三)结论 胰腺癌组织Bmi-1的表达与胰腺癌大小、临床分期、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05)，而与患者的性别、年龄、组织亚型等无关(P>0.05)。Bmi-1阳性患者生存率明显低于Bmi-1阴性患者。Bmi-1检测有助于胰腺癌病人的临床及预后评估。 总结 1.胰腺癌组织存在Bmi-1蛋白的表达，病理切片Bmi-1阳性率为75.3％(61／81)，以核阳性为主。导管腺癌组织学亚型间Bmi-1表达阳性率比较无显著性差别(P>0.05)。 2.胰腺癌组织Bmi-l的表达与胰腺癌肿瘤体积、临床分期、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05)，而与患者的性别、年龄、组织亚型等无关(P>0.05)。Bmi-1阳性患者牛存率明显低于Bmi-1阴性患者。