文献综述对女贞子的基原鉴别、性状鉴别、化学成分、药理作用4个方面的研究现状,神经系统疾病（偏头痛、AD、失眠）的发病机制、临床治疗药物的研究现状,女贞子及其有效成分基于上述3种疾病的药理作用进行了系统阐述。在上述参考文献中未见女贞子相关制备物在神经系统疾病的作用机制和有效物质基础方面的相关报道。目的:获得女贞子在不同病理模型下的最佳制备物药物形式,确定其有效物质基础;获得女贞子制备物药物的药学质量表征方法和女贞子制备物药物的质量控制门径。方法:以药物体系导向药物创新,基于课题组前期药物体系导向制备工艺的研究基础,以关联神经疾病的不同病理状态下的药效为指标,利用紫外可见分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、特征图谱技术等手段对女贞子系列制备物进行定性定量分析,并对女贞子系列制备物的药学与药效质量表征进行系统的关联分析。对基准饮片和14批女贞子饮片的成分类型总含量和指标性成分含量进行关联分析,综合精准评价出饮片质量的优良度,指导如何筛选女贞子饮片来制备更好的制备物以获得治疗相应病理疾病的最佳药效与最佳药物。结果:第一部分女贞子系列制备物药学质量表征研究引用课题组李娟学位论文中的制备工艺,取女贞子粗粉7kg投料,通过提取、碱转化、大孔树脂富集制备得到4个女贞子制备物。分别得到非转化提取物（FZT）、非转化富集物（FZF）、碱转化提取物（ZT）、碱转化富集物（ZF）,课题组前期制备了纯化物（CH）,并对女贞子各制备物进行了预试实验。优化了课题组周文娟学位论文第四章第一节香草醛-高氯酸显色法并测定女贞子系列制备物总萜含量。以H为对照品表征总萜含量,其在0.0044～0.0219g/mL的浓度范围内与吸光度呈现良好的线性关系,平均加样回收率为98.88%,RSD为2.90%。方法学实验结果表明本方法准确、稳定,运用此方法测定了制备物FZT、FZF、ZT、ZF、CH中总萜含量分别约为 Z15%～Z14%、Z10%～Z11%、Z8%～Z7%、Z5%～Z6%、Z1%～Z3%。优化了课题组周文娟学位论文第四章第三节中三氯化铁-铁氰化钾显色法测定女贞子系列制备物总酚含量。以A为对照品表征总酚含量,其在0.001116～0.00558mg/mL的浓度范围内与吸光度呈现良好的线性关系,平均加样回收率为101.05%,RSD为2.65%。方法学实验结果表明本方法准确、稳定,运用此方法对各制备物FZT、FZF、ZT、ZF、CH中总酚的含量进行了测定,其总酚含量分别约为f13%～f14%、f12%～f10%、f7%～f8%、f5%～f6%、f1%～f3%。首次建立了 HPLC同时测定女贞子药物中7个有效指标性成分含量的测定方法,B的线性回归方程为:Y=883894X+1337（r=0.9999）,线性范围是0.0618μg～1.854μg,平均加样回收率为101.15%,RSD为2.20%;A的线性回归方程为:Y=285631X-26612（r=0.9999）,线性范围是0.505μg～20.2μg,平均加样回收率为100.61%,RSD为1.64%;C的线性回归方程为:Y=694994X-8050（r=0.9998）,线性范围是0.051μg～2.04μg,平均加样回收率为102.93%,RSD为1.91%;D的线性回归方程为:Y=1385037X+2446（r=0.9999）,线性范围是0.121μg～2.904μg,平均加样回收率为99.51%,RSD为2.02%;E的线性回归方程为:Y=1545488X-16426（r=0.9999）,线性范围是0.0315μg～5.28μg,平均加样回收率为101.38%,RSD为1.96%;F的线性回归方程为:Y=1633549X-5736（r=0.9998）,线性范围是0.0422μg～0.525μg,平均加样回收率为98.55%,RSD为2.46%;G的线性回归方程为:Y=1134978X+408486,（r=1.0000）线性范围是0.612μg～51.0μg,平均加样回收率为97.53%,RSD为1.33%。方法学考察结果表明,本方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,加样回收率符合定量测定要求,测定结果可靠准确,可用于女贞子系列制备物多有效指标性成分含量的质量表征。根据考察的方法,测定了女贞子各制备物多有效指标性成分含量,FZT、FZF、ZT、ZF、CH 中 B 的含量分别约为b13%～b15%、b10%～b12%、b7%～b9%、b4%～b6%、b1%～b3%,A 含量分别约为 a13%～a15%、a10%～a12%、a7%～a9%、a4%～a6%、a1%～a3%,C 分别约为 c13%～c15%、c10%～c12%、c7%～c9%、c4%～c6%、c1%～c3%;FZT、FZF中D含量分别约为d4%～d6%、d1%～d3%,E含量分别约为e4%～e6%、el%～e3%,G含量约为g4%～g6%、g1%～g3%;FZT中F含量约为h1%～h3%。在ZT、ZF、CH中未检测出有效指标性成分D、E、F、G,在FZF中未检测出有效指标性成分F。利用TLC对各制备物进行定性质量控制,分为4个条件:Ⅰ类以三氯甲烷-甲醇-甲酸（5:1:0.2）为展开剂,定性表征制备物中的B、A、C;J类及K类成分以乙酸乙酯-水-乙酸-甲酸（3:0.15:2:0.2）为展开剂,定性表征制备物中的D、E、G;L类点样后用1%碘-二氯甲烷溶液预处理后,以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（20:5:8:0.2）为展开剂,定性表征制备物中的H、M;N类成分以二氯甲烷-甲醇-水-甲酸（15:5:0.3:0.2）为展开剂,定性表征制备物中的F。建立了女贞子制备物的HPLC特征图谱表征方法,对10批女贞子饮片进行相似度评价与计算,分析其质量优劣,其中饮片样品S2、S10、S7与确定药效的基准饮片S1的相似度较高,均>0.9。通过比较色谱峰的峰面积、保留时间及特征紫外吸收光谱图,对其中的特征色谱峰化学成分进行了归属和确认。CH表征了 6个特征峰,ZF表征了14个特征峰,ZT表征了 14个特征峰,FZF表征了 36个特征峰,FZT表征了 28个特征峰。选择A作为基准峰,将其保留时间、峰面积设为1,计算其他特征峰的相对保留时间和相对峰面积,对各制备物进行了特性质量表征。第二部分女贞子系列制备物药效质量表征研究女贞子系列制备物高、中、低三个剂量作为给药组,随行空白组、模型组、阳性药组进行对照,进行抗偏头痛、AD、失眠药效验证实验,探究女贞子在不同病理模型下的最佳制备物药物组成形式。（1）抗偏头痛药效:在硝酸甘油复制的大鼠偏头痛模型下,测定血清5-HT、CGRP、ET-1含量,以评价女贞子药物抗偏头痛药效结果。造模后的偏头痛大鼠血清中5-HT、CGRP、ET-1含量异常升高;进行药物干预后,可以有效降低偏头痛大鼠血浆中5-HT含量的是纯高、转富高等给药组;降低偏头痛大鼠血浆中CGRP含量作用明显的是非转富高、非转富中、转富高等给药组;各高、中剂量给药组均能降低偏头痛大鼠血浆中ET-1含量。药效结果显示为碱转化富集物>非转化富集物>纯化物>非转化提取物>碱转化提取物。综合分析可知女贞子碱转化富集物抗偏头痛药效优于其他各制备物给药组,在120mg/kg～240mg/kg剂量下药效作用显著。（2）抗AD药效:在氢溴酸东莨菪碱复制的小鼠AD模型下,根据跳台实验行为学结果和AchE活性数据评价药物的药效。药效结果显示为纯化物>碱转化富集物>碱转化提取物>非转化提取物≥非转化富集物,其中纯化物药效最佳,其抑制AD模型小鼠脑组织AchE活性,减少记忆获得和记忆巩固阶段错误次数作用均较优于其他各给药组。碱转化提取物对AD模型小鼠跳台实验行为学的影响也比较显著。（3）抗失眠药效:在PCPA复制的小鼠失眠模型下,进行戊巴比妥钠协同睡眠实验,根据睡眠实验行为学数据和海马中5-HT含量检测结果来评价药物的药效。药效结果显示为纯化物>碱转化富集物>非转化提取物≥非转化富集物≥碱转化提取物。综合分析可知,女贞子纯化物在剂量120～240mg/kg范围内,升高海马体中5-HT含量、延长睡眠持续时间的药效作用最强;碱转化富集物在剂量90～360mg/kg下,缩短戊巴比妥钠协同入睡时间最短。第三部分 女贞子系列制备物药学-药效质量表征关联分析研究通过对女贞子系列制备物的出膏率、有效指标性成分含量、含量相对比值、相对量、基于饮片有效指标性成分含量相对比值、制备物成分组成、有效指标性成分变化幅度和药效贡献度的关联分析,对女贞子系列制备物-饮片进行了系统的质量表征。对女贞子系列制备物-饮片药学关联分析可知,在控制其质量时,不能仅只测定指标性成分含量,还要关注相对含量及其相对量、含量变化幅度、类型成分含量等的质量表征。对女贞子系列制备物药学-药效质量表征进行关联分析确定其药效物质基础。A是降低偏头痛大鼠血清中5-HT含量的有效成分之一,A、B、C及C类似物是降低偏头痛大鼠血清中CGRP、ET-1含量的有效成分,并且其协同增效作用是降低CGRP、ET-1含量的作用机制之一。K类成分D、E可能具有降低血清中CGRP含量的作用。最佳制备物-碱转化富集物有效成分组成为A不得低于a6%,B不得低于b5%,C不得低于c4%,B、C与A含量比值的有效范围分别是:y1/100.0～y2/100.0、y3/100.0～y4/100.0。红景天苷是女贞子中降低AchE活性、调节记忆障碍小鼠短时记忆的主要有效成分,其他苯乙醇类与红景天苷协同可以调节记忆障碍小鼠的长时记忆。最佳制备物-纯化物,A含量不得低于a1%,A与B、C类成分含量比值不得低于x2%,三者协同产生滞后效应,对长时记忆起到协同增效作用。红景天苷是降低失眠模型小鼠海马5-HT含量、延长持续睡眠时间的有效成分之一,羟基酪醇、酪醇及酪醇类似物与红景天苷的协同具有增效作用,可有效缩短失眠小鼠的入睡时间。制备物中A的含量不得低于m2%,A含量越高,延长持续睡眠时间的作用越好;B与A含量的比值范围为y5/100.0～y6/100.0,C与A含量的比值范围为y7/100.0～y8/100.0,一定范围内,比值越大,缩短睡眠时间的协同增效作用越好。基于基准物（基准饮片）质量表征体系作为参比检定标尺,对15批女贞子饮片的成分类型总含量和指标性成分含量进行表征,并以具有确切药效的样品为基准,评价女贞子饮片质量的非关联度、关联度,关联分析特性指标性成分A、G（可转化为A）、B、C的含量及其比值筛选出基于抗偏头痛、AD、失眠药效女贞子饮片质量较优的是所选15批饮片中的样品2、3、5、12,优次顺序为3>2>12>5。根据对女贞子饮片的药学质量表征研究,拟定了女贞子饮片的质量标准。通过对女贞子系列制备物-饮片-药效的关联分析达到有效控制饮片质量的目的,为女贞子饮片资源筛选及其制备物药物的原料质量控制及应用提供了依据。在女贞子药物制备过程中,基于药物体系的基本组成,有针对性地提高有效指标性成分的含量、优化其组成比例是提升药物质量的关键。在药物体系组成成分完整的基础上,提高有效指标性成分的纯度,使各类成分的相对比值更为合理,确保质完整、量得当,以此获得较为理想的女贞子药物。第四部分总结与讨论1.建立了女贞子总成分及指标性成分的含量测定方法,测定女贞子总萜、总酚2种总成分含量,测定A、B、C、D、E、F、G 7种指标性成分的含量,对女贞子系列制备物进行了定量表征。采用薄层色谱法、特征图谱技术对女贞子系列制备物进行了特性表征,达到表征女贞子制备物质量的目的。2.通过对不同病理模型下女贞子系列制备物药学-药效的关联分析,明确了不同病理模型下的最佳制备物药物形式,确定了其有效物质基础。3.将饮片质量评价模式应用于15批女贞子饮片的质量评价,为饮片资源筛选及其药物的原料质量控制及应用提供了依据。拟定女贞子质量表征操作规范,基于2015版药典,建立了女贞子总酚、总萜、指标性成分的含量测定方法及质量标准。