论文部分内容阅读
背景糖尿病已成为全球性问题,正在威胁着人类的健康.糖尿病病人血糖水平较高,较高的血糖会损伤各个组织器官,因此糖尿病病人常伴有多种并发症,包括神经病变等。TRPV1是一种表达在感觉神经纤维上的非选择性阳离子通道。药理学研究表明,TRPV1所发挥的心血管保护作用与其合成释放的神经肽CGRP有关。TRPV1可激活CaMK,活化的CaMK色磷酸化CREB,增加CGRP的表达。芍药苷是一种单萜糖苷,具有多种药理学作用,包括抗炎,抗氧化及免疫调节等,此外芍药苷在保护神经病变和缺血性疾病中也有重要的作用。目的已有研究证实芍药苷具有保护心肌缺血损伤作用,但其具体机制仍不明确。本实验旨在探究芍药苷对糖尿病合并心肌缺血损伤的保护作用,并探讨其潜在的分子学机制。方 法1.链脲霉素可破坏小鼠胰岛细胞,诱发小鼠糖尿病。本实验用链脲霉素构建糖尿病模型2.心肌梗死模型由结扎小鼠心脏前降支构建。3.本实验分成WT型糖尿病组+未给药组, WT型鼠糖尿病+芍药苷组,WT型鼠糖尿病+芍药苷+KN-93组,TRPV1基因敲除鼠糖尿病+未给药组,TRPV1基因敲除鼠糖尿病+芍药苷组,TRPV1基因敲除鼠糖尿病+芍药苷组+KN-93组.4.测定小鼠体重及血糖,心梗面积,心肌酶谱,血清CGRP浓度,组织病理学及相关分子的表达变化。结果1.在芍药苷处理先后对比,各组间小鼠体重及血糖无明显统计学差异；2.在WT型糖尿病鼠中,与未给药组相比,芍药苷组小鼠心梗后心梗面积和血清心肌酶谱减少。病理学提示未给药组心梗后心肌纤维化程度明显,芍药苷组显示心肌纤维化程度明显减轻。芍药苷组血清CGRP含量也较未给药组高,结果有统计学差异。给予芍药苷处理组的小鼠TRPV1分子表达水平增高。3.在TRPV1基因敲除型小鼠中,给予芍药苷后心梗面积、血清心肌酶水平较未给药组明显下降,血清CGRP含量比未给药组明显增高。TRPV1基因敲除型小鼠给药后心肌纤维化程度比未给药组轻。以WT糖尿病小鼠+芍药苷组作为对照,TRPV1基因敲除型小鼠+芍药苷组的心梗面积,心肌酶增咖,血清CGRP含量减少,心肌纤维化程度较严重。4.在WT型糖尿病鼠中,给予芍药苷治疗后再给予KN-93,小鼠心梗后心梗面积,血清心肌酶增高,心梗后心肌纤维化程度加重,血清CGRP含量减少。5. Western Blot分析CREB蛋白表达情况。给予芍药苷处理可增加糖尿病小鼠CREB磷酸化的表达,而芍药苷对TRPV1基因敲除鼠及KN-93处理组无明显影响。结论芍药苷可保护耱尿病小鼠合并心肌缺血损伤,这种保护作用可能与TRPV1/CaMK/CREB/CGRP这条通路有关。