树突状细胞在月经周期子宫内膜和妊娠早期蜕膜组织中数量及分布研究

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目的:树突状细胞(dendritic cells,DC)是一类重要的专职抗原提呈细胞,它可以直接激活静息T细胞产生免疫反应。DC既能诱导有效的免疫应答,又可诱导免疫耐受。近年更多的研究表明,DC在外周免疫耐受中起关键性作用。正常妊娠作为一种生理过程,从免疫学角度看是母体免疫系统对含有一半父方抗原—胚胎免疫耐受的成功事件。本实验通过对不同月经周期子宫内膜组织及妊娠早期蜕膜组织中抗原提呈细胞数量及分布的系列研究,探讨DC在围着床期为胚胎提供正常免疫微环境中的作用。方法:非妊娠期子宫内膜标本取自46例生育期年龄妇女,平均年龄38.6±0.4(32~46)岁。她们因子宫良性疾病而行子宫切除术,经病理检查子宫内膜无异常发现,并都有规律的月经周期,术前一年未服任何激素类药物及使用宫内节育器。根据月经史及组织学Noye氏标准来确定月经周期时相。46例中21例为增生期,12例为早分泌期,13例为晚分泌期。妊娠早期蜕膜组织来源于23例妊娠7~9周的胚胎植入部位的蜕膜组织,终止妊娠前经超声检查证实胚胎发育正常并与停经月份相符。妊娠产物均经病理检查证实,蜕膜组织在液氮中速冻后,-70℃冰箱保存。用HE染色进行形态学观察,免疫组化SP法和图像分析检测CD83+、DC-SIGN+、HLA-DR、CD68+、CD14+细胞的数量、平均密度和分布情况。所有数据应用SPSS12.0统计软件进行统计学分析,实验结果均以x±s表示,采用H检验、单因素方差分析等方法,P<0.01有统计学意义。结果:1 CD14+是单核细胞的标志物,整个月经期的平均密度为:90.1个细胞/mm2,各月经时相之间CD14+细胞没有差异。妊娠早期也没有明显变化。2 CD68是成熟巨噬细胞的标志物,广泛分布于整个子宫内膜组织中,其平均密度为113.1个细胞/mm2,在增生期、早分泌期和妊娠早期细胞的数量没有显著统计学差异,在分泌晚期有所增加,但与增生期内膜和妊娠早期蜕膜组织中的数量比较无统计学意义。3 DC-SIGN特异性表达于未成熟DC表面,整个月经周期的细胞数量很少但相对恒定,平均密度57.4个细胞/mm2。DC-SIGN阳性细胞在妊娠早期蜕膜组织,平均密度151.6个细胞/mm2,主要位于胚胎植入部位,即滋养层细胞下方,平均细胞数量较非孕期子宫内膜增加三倍左右,统计学分析差异有显著性意义(P<0.01)。4 CD83为成熟DC特异性表达,在整个月经周期子宫内膜组织中只能检测少量的CD83+细胞,呈散在分布。晚分泌期的数量较分泌早期和妊娠早期多,但差异无统计学意义。5 HLA-DR是MHC-II类分子,在月经周期各时相子宫内膜组织的平均数量无显著差异,但妊娠早期蜕膜组织中HLA-DR的数量与各期子宫内膜相比有明显增加(P<0.01)。结论:1月经周期不同时相子宫内膜和早期蜕膜组织中含有不同数量的抗原提呈细胞及其它免疫细胞,这些细胞在不同时相表现出数量和分布的变化。这说明母体免疫系统的适应性改变对胚胎的着床有重要意义,变化的原因可能与孕酮的水平有关。2巨噬细胞在月经周期和妊娠早期的数量较恒定,散在分布于内膜组织中,其功能可能为防止子宫内病原体的侵入提供免疫屏障,但可能受性激素的影响较少。。3 CD83是成熟DC的特异性标志,它少量存在于晚分泌期和妊娠早期,它在围着床期的作用可能是通过诱导T细胞免疫反应产生少量的成功妊娠所必需的Th1型细胞因子。4 DC-SIGN+作为未成熟DC的标志物,在妊娠早期蜕膜组织中的数量显著增加,且主要位于绒毛植入处的底蜕膜部位。这一特征可能在母胎界面的免疫耐受调节中发挥着重要作用。5 uNK细胞为妊娠早期数量较多的免疫细胞,它部分位于绒毛侵袭处,本研究显示,表达HLA-E的绒毛外滋养层细胞与表达抑制性受体CD94/NKG2A的uNK细胞存在直接的接触,这种结合可能降低或抑制了uNK细胞的自然杀伤活性。6研究显示未成熟DC与uNK细胞之间也存在着直接接触,可能通过受体或细胞因子的相互作用来维持母胎界面的免疫微环境。
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