【摘 要】
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链霉菌复杂的形态分化过程是链菌研究热点之一.天蓝链霉菌基因组计划的完成,为形态及生理分化发育的研究提供了大量有用的信息.该研究根据天蓝色链霉菌基因组计划测出的序列,
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链霉菌复杂的形态分化过程是链菌研究热点之一.天蓝链霉菌基因组计划的完成,为形态及生理分化发育的研究提供了大量有用的信息.该研究根据天蓝色链霉菌基因组计划测出的序列,对两个可能与形态分化及生理分化起负调节作用的nrs周源基因,通过基因中断或置换,表型观察和胞内互补及定点诱变等方法来确定它们的功能及bldA的关系.首先,利用已构建的一系列基因中断(置换)结构对M145染色体上相对应的基因进行中断(置换),试图寻找bldA调节分化的靶基因.用Southern杂交的方法验证双交换的发生.观察双交换菌株表型,大多在各种培养基上与野生型菌株M145无明显的形态学差异只有SC5H1.40c和SC5H1.41的基因中断菌株ZH1与野生型菌株M145在SFM上表现出差异,即能过量产生放线紫红素.这种表型能被含有完整的两个基因的整合载体pHZ2543互补,而不能被只含有一个SC5H1.40c的整合型载体pHZ2533互补.然后,构建了只中断SC5H1.40的基因中断结构pHZ2531,用接合转移的方法导入M145,得到的接合转移子与ZH1表型一致,命名为ZH2为出发菌株,松弛培养筛选Am的后代,发现它们的表型都恢复到野生型的水平,即不再过量产生放线紫红素.因此,我们初步认定SC5H1.40是一个放线紫红素合成的负调控基因.
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