实验目的:探讨1-甲基乙内酰脲单独应用及与5-氟尿嘧啶联合对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制和诱导凋亡作用。实验方法：以体外培养的人结肠癌SW480细胞株为实验研究对象。实验分为对照组（等量PBS）、1-甲基乙内酰脲组（M）、5-氟尿嘧啶组（Fu）、甲基乙内酰脲与5-氟尿嘧啶联合组（M＋Fu）共四大组。1.MTT比色法检测细胞增殖抑制率：①1-甲基乙内酰脲对SW480细胞增殖的抑制作用：根据文献数据和预实验，将1-甲基乙内酰脲组设八个浓度组(M：0.5mg·L^-1、5mg·L^-1、10mg·L^-1、20mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1、200mg·L^-1、500mg·L^-1)；1-甲基乙内酰脲八个浓度组分别干预人结肠癌SW480细胞24、48、72小时后，MTT法检测1-甲基乙内酰脲对SW480细胞增殖的抑制作用。②1-甲基乙内酰脲、5-氟尿嘧啶分别应用对SW480细胞增殖的抑制作用：根据文献数据和预实验将1-甲基乙内酰脲、5-氟尿嘧啶分别设四个相同浓度组，以利比较抑制效果。各组分别为M10mg·L^-1、M20mg·L^-1、M50mg·L^-1、M100mg·L^-1；Fu10mg·L^-1、Fu20mg·L^-1、Fu50mg·L^-1、Fu100mg·L^-1。上述各浓度组分别干预人结肠癌SW480细胞，48小时后MTT法检测各浓度组对SW480细胞增殖抑制作用。③1-甲基乙内酰脲与5-氟尿嘧啶联合应用对SW480细胞增殖的抑制作用：1-甲基乙内酰脲与5-氟尿嘧啶联合应用设四个组：M10mg·L^-1＋Fu10mg·L^-1、M20mg·L^-1＋Fu20mg·L^-1、M50mg·L^-1＋Fu50mg·L^-1、M100mg·L^-1＋Fu100mg·L^-1。上述各浓度组分别干预人结肠癌SW480细胞，48小时后MTT法检测各组对SW480细胞增殖抑制作用，并与单独应用5-Fu作用进行比较。2.显微镜下细胞形态学观察：为了观察1-甲基乙内酰脲对SW480细胞增殖抑制作用的形态学效果，应用1-甲基乙内酰脲和5-氟尿嘧啶分别干预SW480细胞，在显微镜下观察细胞形态学改变，HE染色后显微镜下观察结肠癌SW480细胞形态变化。①M100mg·L^-1、Fu100mg·L^-1分别干预人结肠癌SW480细胞24、48、72小时后，显微镜下观察结肠癌SW480细胞形态变化并摄像。②M50mg·L^-1、Fu50mg·L^-1分别干预结肠癌SW480细胞，48小时后HE染色，显微镜下观察结肠癌SW480细胞形态变化并摄像。3.流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布：为了检测1-甲基乙内酰脲对SW480细胞凋亡及细胞周期分布的影响，应用1-甲基乙内酰脲和5-氟尿嘧啶干预SW480细胞，各组分别干预SW480细胞48小时后，FCM检测细胞凋亡率及细胞周期分布。①1-甲基乙内酰脲二个浓度组：M20mg·L^-1、M50mg·L^-1；②5-氟尿嘧啶一个浓度组：Fu20mg·L^-1；③1-甲基乙内酰脲与5-氟尿嘧啶联合二个浓度组：M20mg·L^-1＋Fu20mg·L^-1、M50mg·L^-1＋Fu20mg·L^-1；实验结果：1. MTT法检测结果显示：①1-甲基乙内酰脲在5～500mg·L^-1浓度范围能抑制SW480细胞增殖，增殖抑制率呈浓度递增趋势。各组间两两比较差异有显著性（P＜0.05）。②1-甲基乙内酰脲单独应用时，作用于结肠癌SW480细胞48小时后，对SW480细胞增殖抑制作用最强。③10、20mg·L^-11-甲基乙内酰脲对SW480细胞的抑制作用与等浓度的5-Fu作用相比，差异无显著性（P＞0.05）；50、100mg·L^-11-甲基乙内酰脲对SW480细胞的抑制作用不及等浓度5-Fu，差异有显著性（P＜0.05）。④1-甲基乙内酰脲和5-FU联合应用对肿瘤细胞的增殖抑制作强于单独应用相等浓度的1-甲基乙内酰脲、5-Fu，差异有显著性（P＜0.05）。⑤M10mg·L^-1＋Fu10mg·L^-1对SW480细胞增殖抑制作用与5-Fu20mg·L^-1单独应用效果相当，差异无显著性（P＞0.05）；M50mg·L^-1＋Fu50mg·L^-1对SW480细胞增殖抑制作用强于5-Fu100mg·L^-1（P＜0.05）。2.显微镜下观察各实验组细胞形态改变:①1-甲基乙内酰脲、5-Fu连续处理的SW480细胞在显微镜下观察均显示细胞体积变小，细胞形态变圆，细胞异形性减少，细胞核体积变小，核仁数目减少，染色变淡，细胞间连接变疏松，部分细胞不再贴壁。②1-甲基乙内酰脲、5-Fu连续处理的SW480细胞HE染色后显微镜下观察均显示细胞变圆且分散，细胞体积缩小，细胞浆浓缩，核染色变淡，核仁数减少；部分细胞核膜消失、细胞溶解碎裂。3.FCM结果显示：与对照组相比，1-甲基乙内酰脲、5-Fu各处理组SW480细胞凋亡率增加，细胞周期分布中S期细胞分布增多，差异具有显著性（P＜0.05）。与Fu20mg·L^-1组相比,联合应用组处理的SW480细胞凋亡率增加，细胞周期分布中S期细胞分布增多，差异具有显著性（P＜0.05）。结论：1.1-甲基乙内酰脲在体外对人结肠癌SW480细胞有抑制增殖及诱导细胞凋亡的作用。2.低浓度时，1-甲基乙内酰脲抑制人结肠癌SW480细胞增殖的效果与5-Fu相当；高浓度时，1-甲基乙内酰脲抑制人结肠癌SW480细胞增殖的效果弱于5-Fu。3.1-甲基乙内酰脲与5-Fu相联合应用具有协同抗肿瘤作用。