溶藻弧菌广泛分布于世界各地的海水及河口处,存在于多种海洋动物的体表及体内,是海洋养殖环境中最常见的条件致病菌之一。近年来,由于气候变化及海水温度上升的影响,溶藻弧菌感染的发病率显著增加,给我国水产养殖业带来了巨大的经济损失。本课题组早期从自然发病的养殖大黄鱼中分离出具有较强毒性的溶藻弧菌ND-01菌株,并对其进行转录组测序分析,发现了一种具有毒力调控作用的非编码RNA Vvrr1(Vibrio virulence regulatory RNA 1)。本研究通过构建Vvrr1过表达菌株并进行蛋白质组学分析,发现多种与毒力相关的Vvrr1潜在靶基因,其中pykF及leuO在Vvrr1参与的溶藻弧菌毒力调控机制中发挥着重要的枢纽作用。此外,我们不仅利用GFP报告基因分析技术明确了Vvrr1与pykF的作用方式,还利用转录组测序及Chip-seq预测、筛选了LeuO靶基因及其靶标ncRNA,为Vvrr1、pykF、leuO参与调控溶藻弧菌毒力的机制提供理论基础。通过以上研究,我们在溶藻弧菌中总结出两种Vvrr1参与毒力调控的可能模式:(1)以“Vvrr1-pykF”为主轴的与粘附相关的毒力调控模式。其中Vvrr1通过直接调控pykF,间接调控pykF相关基因(eno、sdhB、glpF、cysH、ndk)来参与调控溶藻弧菌粘附的毒力机制。在该模式中,Vvrr1、pykF、eno、sdhB、glpF、cysH参与调控溶藻弧菌的成膜能力与粘附能力,而ndk仅参与调控溶藻弧菌的粘附能力。(2)以“Vvrr1-leuO-LeuO靶基因/靶标ncRNA-BF通路基因”为主轴的与生物成膜相关的毒力调控模式。其中Vvrr1通过直接负调控leuO,进而间接调控LeuO靶基因或靶标ncRNA及BF通路基因的表达水平来参与调控溶藻弧菌生物成膜通路中的多种代谢及信号传导过程。在该模式中,LeuO、ncRNA49、ncRNA212、ncRNA78参与调控溶藻弧菌的成膜能力与粘附能力。