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目的:研究姜黄素对肝细胞LDLR的表达和摄取LDL的影响,及其与驱动蛋白家族成员KIF16B之间的关系和作用机制,为姜黄素类降脂药物的临床开发提供理论支持和科学启发。方法:肝HepG2细胞和肝LO2细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中体外培养24小时。CCK8法检测肝细胞活性。油红O染色检测肝细胞内脂质含量。胆固醇检测试剂盒检测肝细胞内胆固醇水平。Dil染料标记的LDL与肝细胞共孵育检测细胞对LDL的摄取。免疫印迹实验检测肝细胞内LDLR和KIF16B的蛋白表达。细胞免疫荧光染色实验检测肝细胞内KIF16B与LDLR的共定位情况。流式细胞技术检测肝细胞表面LDLR的表达丰度。结果:1.CCK8结果显示,10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L的姜黄素对肝HepG2细胞和肝LO2细胞的活性没有显著性影响,表明前期实验中25μmol/L的姜黄素适用于本研究。2.油红O染色结果表明,在肝HepG2细胞和肝LO2细胞中,与Control组相比,Rosuvastatin组和Curcumin组内红色脂滴含量明显增多。3.细胞内胆固醇含量检测结果表明,在肝HepG2细胞和肝LO2细胞中,与Control组相比,Basal组内总胆固醇水平(TC)和游离胆固醇(FC)水平有所降低,而Rosuvastatin组和Curcumin组内TC和FC含量显著升高,差异有统计学意义。4.Dil-LDL的细胞摄取结果表明,在肝HepG2细胞中,与Control组相比,Basal组的红色荧光减少,而LPDS组、Rosuvastatin组和Curcumin组内红色荧光明显增多;在肝LO2细胞中,与Control组相比,Basal组和25-HC组的红色荧光显著减少,而LPDS组、Rosuvastatin组和Curcumin组内红色荧光增多。5.免疫印迹实验结果表明,在肝HepG2细胞和肝LO2细胞中,与Control组相比,Basal组内LDLR和KIF16B蛋白表达无差异,而Rosuvastatin组和Curcumin组内LDLR和KIF16B蛋白含量明显增多。6.细胞免疫荧光染色实验结果表明,在肝HepG2细胞和肝LO2细胞中,与Control组相比,Basal组和Rosuvastatin组的KIF16B和LDLR荧光共定位率未发生显著改变,而Curcumin组的KIF16B和LDLR荧光共定位率明显升高。7.流式细胞术结果表明,在肝HepG2细胞膜表面,与Control组相比,Basal组的LDLR丰度降低,而LPDS组、Rosuvastatin组和Curcumin组的LDLR丰度明显升高;在肝LO2细胞膜表面,与Control组相比,Rosuvastatin组和Curcumin组的LDLR表达丰度明显升高。结论:姜黄素增加LDLR蛋白表达、促进肝细胞摄取LDL的机制,可能与KIF16B介导LDLR向质膜的转运有关。