整合蛋白连接激酶(ILK)依赖磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)活化后参与多种细胞内多个与细胞增殖相关的信号转导途径,结合前期研究发现在山羊骨骼肌细胞中,ILK活性受到抑制后肌细胞增强因子2C (MEF2C)被充分激活,进而促进与相关转录因子启动子的结合来调控这些基因的表达。但是,ILK是否以依赖PI3K方式激活MEF2C的活性来调控肌细胞的增殖仍不清楚。在本研究中我们以C2C12为模型探究在骨骼肌细胞增殖过程当中ILK信号通路的激活方式,下游MEF2C因子的活性调控方式以及与骨骼肌细胞增殖分化相关转录因子的活化方式,为进一步了解骨骼肌发育的调控通路提供实验依据。本研究采用添加抑制剂和转染干扰载体两种方法来抑制C2C12细胞中ILK的磷酸化水平,结果发现,10μM Cpd22处理后ILK的磷酸化水平降低为对照组的51.65%,同时,MEF2C的磷酸化水平却提高为对照组的141.18%,MCK基因的表达升高为354.78%；而转染干扰载体之后,C2C 12细胞中ILK的表达量降低为31.10%,磷酸化水平也降为45.20%,MEF2C的磷酸化水平也相应的提高为146.38%,MCK基因的表达提高为182.99%。由药物抑制剂和干扰实验共同说明ILK负调控MEF2C磷酸化活性进而调控转录因子MCK的转录活性。为了探讨在ILK的这种调控过程中,其信号通路中PI3K发挥的作用,本研究使用PI3K抑制剂处理C2C12细胞,结果发现,PI3K的活性被抑制后,ILK的磷酸化水平降低为54.44%,MEF2C的磷酸化水平降低为91.71%,MCK基因的表达也降低为41.56%。如果在抑制PI3K活性的同时抑制ILK的活性,MEF2C的磷酸化水平却提高了113.60%,MCK基因的表达提高了170.97%,但提升幅度低于单独抑制ILK实验组。可见ILK的活性依赖PI3K的活化,但抑制PI3K的活性却没有直接负调控MEF2C的磷酸化活性。以上研究结果证实：活化后的ILK对MEF2C的磷酸化活性和转录活性为负调控,然而以依赖P13K的方式活化后的ILK并没有直接对下游的MEF2C的活性和转录活性进行负调控。这一研究结果补充了PI3K-ILK-下游相关蛋白和转录因子这一经典信号通路的调控方式,为研究细胞的增殖调控提供了实验依据。