论文部分内容阅读
目的 应用Southern杂交技术，对皮肤、肌肉端粒DNA片断长度(mean length of telomere restriction fragment，简称：TRF)进行观察，测定不同年龄段人群的端粒DNA片断长度值，以期初步探明不同年龄段人群的端粒DNA片断长度的变化规律，绘制出端粒DNA片断长度值随年龄变化的标准曲线，比较性别、籍贯对端粒DNA片断长度的影响，以期为法医实践工作中对无名尸体年龄推断提供理论依据。 方法 采用Southern杂交的方法。随机取60名无关个体的皮肤、71名无关个体的肌肉，用蛋白酶K消化样本，酚、氯仿法抽提出DNA，测出DNA的浓度，用地高辛标记探针并确定探针最适工作浓度，Hinf Ⅰ酶消化DNA，琼脂糖凝焦电泳分离DNA片断后，行真空转膜，洗膜，进行Southern杂交，BCIP／NBT法染色显色后，进行图像分析，得出不同年龄段供体的端粒DNA片断长度值。 结果 对皮肤、肌肉组织端粒DNA片断长度值与年龄的依存关系进行回归分析，得到的回归系数分别为：b_皮=53.302、b_肌=54.147；回归方程模型为： Y皮=53.302·l／X+6.069 Y肌=54.147·l／X+6.047 [Y：代表年龄(岁)；X：代表端粒DNA片断长度值(Kb)] 用得到的端粒DNA片断长度值，检验性别、籍贯对皮肤、肌肉的TRF值的影响关系，发现：(1)在不同性别间，端粒DNA片断长度值有显著性差别(p＜0.05)，同年龄组女性较男性的TRF值大。(2)对比山西和北京两地人群的TRF值，未发现显著性差别(P＞0.05)。(3)比较同年龄组的皮肤和肌肉之间的TRF值，也未发现显著性差别(P＞0.05)。 11}西医科丸学2()()3届硕1学位论文 结论皮肤、肌肉的端粒DNA片断长度随着年龄的增加而逐渐缩短，其随年龄缩短的速率在各个年龄段不同，青少年时期缩短的速率较快，成年后缩短速率相对减慢。在不同性别之间，1司年龄组女性较男胜的端粒D肋片断长度值大。对比同年龄组d_l西人群和北京人群的端粒I)NA片断一长度，没有发现显著性差别。皮肤和肌肉两种组织的端粒DN八片一断用工年龄推断时，没有优劣之分。