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预测人体肿瘤细胞放射敏感性的方法学研究 实验Ⅰ “彗星”分析法测定辐射诱导人体肿瘤细胞DNA断裂与修复和放射敏感性的关系 目的:探讨“彗星”分析法(Comet Assay)在检测体外培养人体肿瘤细胞DNA放射损伤与修复和放射敏感性的关系。 材料与方法:采用碱性“彗星”分析法这一可在单细胞内检测可显像的DNA单链断裂(Single Strand Breaks,SSBs)的微胶电泳技术,并以尾矩(Tail Moment)作为SSBs定量评价的终指标,来检测鼻咽高分化鳞癌上皮细胞系(CNE-1)、食管鳞状上皮细胞系(Ec-109)、肺腺癌细胞系(GLC)、胃低分化腺癌细胞系(BGC-823)和直肠腺癌细胞系(HR-8348)五种人体肿瘤细胞系照射后其SSBs程度及其与放射剂量的关系,以及CNE-1和GLC两细胞系在分别接受了16GyX射线照射后的自身修复情况,均与相应细胞系细胞存活曲线进行比较。 结果:采用碱性“彗星”分析法,可以确切检测出4Gy单一放射剂量所诱导的五系细胞DNA的SSBs,可见DNA损伤程度在不同照射剂量其结果不同,随剂量递增DNA损伤加重,与放射剂量呈良好的线性关系。在16Gy剂量点下各细胞系的SSBs程度大小依次为CNE-1>Ec-109>GLC>BGC-823>HR-8348;CNE-1、Ec-109、GLC和BGC-823各细胞系的Do值分别为1.25、1.27、1.88和1.56,在鳞癌和腺癌细胞系间尾矩大小和Do值之间有较好的负相关性。16Gy单一放射剂量诱导CNE-1和GLC两系细胞的DNA损伤后,其半值修复时间分别为7.4和