论文部分内容阅读
一、探讨污泥干化芦苇床稳定化污泥中甲烷氧化菌多样性,利用PCR-DGGE技术分析不同时期、不同干化床污泥中甲烷氧化菌群落变化。通过对DGGE图谱的聚类分析了不同样品的相似度。计算1单元到3单元芦苇床污泥样品随着不同月份变化得出的香农-威纳(Shano-Wiener)指数分别为2.03、1.09、1.87,2.04、1.36、1.95,1.59、1.17、1.92,均匀指数分别为0.99、0.97、0.95,0.97、0.98、0.99,0.95、0.97、0.99,即随着不同月份的改变,1单元干化床的均匀指数均下降,2、3单元干化床的均匀指数均上升。利用测序后得到的序列进行亲缘性比对,并结合优势种属的变化分析污泥样品甲烷氧化菌群落的演替。结果表明,污泥干化芦苇床污泥样品中甲烷氧化菌的多样性,可以通过PCR-DGGE分析。同一时期不同干化床污泥中甲烷氧化菌群落相似度较高；而同一干化床、不同时期污泥中的甲烷氧化菌群落有一定的差异。污泥干化芦苇床中优势种属主要随芦苇生长时期和污泥稳定化时间的延长而改变。基于序列和系统发育树分析,干化床污泥样品中主要的优势菌属是未培养的Ⅰ型甲烷氧化菌,表明有通气结构的芦苇床更能有效氧化甲烷,有利于减少甲烷的排放。二、从2单元污泥干化芦苇床样品中分离筛选出Ⅱ型甲烷氧化菌。利用涂平板,进行稀释分离。本菌株的分类,可以根据不同相的分类方法。结果表明,菌株W5在培养基中生长良好,粉红色,根据系统发育、形态特征、等分析表明菌株W5属于甲基杆菌属(Methylobacter)。三、利用厌氧技术从3单元污泥干化床中分离出一株产甲烷菌株C5,在荧光显微镜下观察该菌落有蓝绿色荧光。通过对C5菌株的16S rDNA进化地位分析,它与甲烷八叠球菌属的相似性最大99%,根据系统发育树分析以及形态学分析此菌株为甲烷八叠球菌属(Methanosarcina)。