【摘 要】
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金柑作为一种可带皮食用的柑橘类植物,日益受到水果消费者的喜爱。金柑新品种选育以田间芽变结合形态学鉴定为主要手段,存在周期长、工作量大、鉴定结果不准确且突变性状不稳定等问题。故本研究以金柑属及其近缘属38份种质为研究对象,进行种质资源的特异性分子标记筛选、花粉育性的比较及人工杂交授粉实验,为金柑杂交技术的建立提供初步的理论依据,以期获得金柑杂种。主要研究结果如下:1.利用23对SSR引物对38份金柑
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金柑作为一种可带皮食用的柑橘类植物,日益受到水果消费者的喜爱。金柑新品种选育以田间芽变结合形态学鉴定为主要手段,存在周期长、工作量大、鉴定结果不准确且突变性状不稳定等问题。故本研究以金柑属及其近缘属38份种质为研究对象,进行种质资源的特异性分子标记筛选、花粉育性的比较及人工杂交授粉实验,为金柑杂交技术的建立提供初步的理论依据,以期获得金柑杂种。主要研究结果如下:1.利用23对SSR引物对38份金柑及其近缘属种质进行扩增,总共扩增到265条有效条带,其中多态性条带250条,多态性比率接近92.99%,扩增后得到的条带片段长度在100bp-1200bp之间;共计得到47个种质特异性标记,其中6份柑橘属材料扩增到13个特异性标记,4份枳属材料中筛选到4个特异性标记,2份金柑杂种材料具有6个特异性分子标记,而剩余的19份金柑属材料共计24个特异性分子标记,结果表明不同种质之间的特异标记数量差别较大;在遗传相似系数为0.720处聚类,可将材料分为三大类。第一类为浏阳酸橘,第二类为越南桔和公孙桔,第三类为金柑属、枳属和部分柑橘属。其中浏阳金弹与蓝山金柑在0.98处聚在一起,可能存在同物不同名现象。2.使用0.5%TTC法对不同品种的金柑属植物进行花粉活力测定,结果显示在小蕾、大蕾、初开及盛开4个时期不同品种的花粉活力不同,所有品种花粉活力均呈现先增长后减弱的单峰趋势且在初开时期活力最强,其中蓝山金柑的初开花粉活力最高,为61.73%;用联苯胺—过氧化氢法测定不同金柑品种的柱头活性,结果显示不同品种在小蕾、大蕾、初开及盛开4个时期的柱头活性的强弱不同,所有品种柱头活性均呈现先增长后减弱的单峰趋势且在初开时具有最强的活力,与花粉活力的变化趋势具有一致性。3.对部分金柑品种做去雄不授粉处理,不同金柑品种间单性结果率不同,且均结果能力低下,其中蓝山金柑的单性结果率最高为8.57%且存在饱满的种子。表明金柑存在一定的单性结实且珠心胚细胞可以发育成种子。4.对花粉管进行观察发现,授粉2h后所有自交和异交花粉管均开始萌发,无明显差异;授粉48h后所有异交花粉管和4个自交花粉管均可到达子房,而在授粉12h~24h时有3个品种的自交花粉管在花柱2/3处停止生长;对授粉坐果率统计发现,不同金柑自交及异交均具有不同的坐果率且异交坐果率较自交显著提高。在所有自交授粉中,蓝山金柑的坐果率最高,为17.20%,而在所有异交授粉中,浏阳金柑CQ(♀)×蓝山金柑(♂)坐果率高达50%,为最高;所有自交及异交授粉收果率较坐果率显著降低,其中自交授粉中蓝山金柑收果率最高为4.30%;所有异交授粉中,浏阳金柑CQ(♀)×蓝山金柑(♂)收果率为13.00%,为最高。5.对人工异交授粉果实与自然授粉果实进行比较发现,除牛奶金柑(♀)×蓝山金柑(♂)的人工异交授粉果实在果形上与其自然授粉的亲本果实有差异外,其他人工异交授粉果形均与自然授粉条件下的父母本果实之间无明显差异;从果实大小来看,人工异交授粉果实相较于自然授粉父母本果实个头较小;人工异交授粉种子与自然授粉亲本种子形状无明显差异。试验共计得到146粒人工异交授粉种子,其中20粒种子萌发成幼苗,利用父母本特异性标记对幼苗进行鉴定,共获得2株杂种幼苗。
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