论文部分内容阅读
目的研究二氮嗪对深低温缺血再灌注大鼠的脑组织NR1的表达变化进而探讨二氮嗪的脑保护作用机制。方法第一部分动物实验将健康SD大鼠麻醉后用冰袋包埋降温至(21±1)℃，阻断双侧颈总动脉，60min后恢复血流，并行复温至复苏。第二部分二氮嗪对深低温脑缺血再灌注大鼠NR1表达的影响。将SD大鼠随机分成3组：假手术组、二氮嗪组和模型组。每组又分为缺血1h后再灌注2、6、12h及1、2、3、7d共7个小组，对脑组织行HE染色，并采用免疫组织化学技术检测脑组织NR1的表达。第三部分二氮嗪对深低温脑缺血再灌注大鼠NR1 mRNA表达的影响。将SD大鼠随机分成3组：假手术组、二氮嗪组和模型组。每组又分为缺血1h后再灌注2、6、12h及1、2、3、7d共7个小组，对脑组织行含水量检测，电镜检查及应用RT-PCR技术检测各时间点NR1 mRNA的表达变化。用SPSS 11.0统计软件分析实验数据。结果1．脑含水量结果：假手术组脑组织含水量明显低于二氮嗪组和模型组，二氮嗪组低于模型组，模型组和二氮嗪组脑组织含水量在12h开始升高、1d达高峰、3d基本恢复正常。2．HE染色结果：光镜下模型组有明显的缺血性改变，表现为组织疏松、核质固缩、核仁消失，胞浆疏松，染色变浅，胞浆及血管周围空化。假手术组在光镜下组织结构清楚，核仁存在，无病理改变。二氮嗪组细胞略肿胀，核仁存在。3．电镜结果：三组大鼠脑组织在缺血1h再灌注6小时脑组织超微结构未见明显区别，24小时模型组出现神经胶质细胞凋亡倾向，未出现凋亡，线粒体无肿胀，其余两组基本正常。4．免疫组化结果：模型组和二氮嗪组NR1均在2h开始升高，1d达到高峰，7d后基本达到正常水平，但二氮嗪组NR1表达水平在2、6、12h及1、2d明显低于模型组，且两组NR1表达水平均高于假手术组。5．RT-PCR结果：假手术组NR1mRNA呈低水平的表达，模型组和二氮嗪组在缺血再灌注2小时开始增加，1d达高峰后下降，7d三组无明显差异。模型组增加幅度明显高于二氮嗪组。结论二氮嗪预处理对深低温缺血再灌注大鼠具有脑保护作用，其作用机制可能是通过下调脑组织NR1的表达来实现。