萎缩性阴道炎是由于女性外周雌激素水平降低继发阴道上皮萎缩所导致的炎症性疾病。世界范围内,约有25%-50%绝经后女性受到萎缩性阴道炎的困扰。雌激素补充治疗是目前针对萎缩性阴道炎的首选措施。但长期大剂量使用雌激素目前仍然存在争议,其风险不容忽视,存在较多困难和疑问。近年随着人类元基因组计划和分子微生态技术的不断推进与发展,阴道微生物群落的研究也逐渐受到关注。共生微生物在维持妇女阴道健康中的潜在作用和价值也开始得到重视。尽管以往有关萎缩性阴道炎的发病以及诊治国内外有相关研究,但是对于中国绝经后妇女阴道微生物群落组成、结构特征及其在萎缩性阴道炎发生发展中的作用及其机制等,迄今依然知之甚少;而运用分子微生态技术研究萎缩性阴道炎的致病因素和治疗方法,国内属于空白。我们以16S rRNA基因为研究靶点,采用第二代高通量测序技术(Illumina sequencing)结合生物信息学分析:(1)首先对29例绝经后女性的阴道共生微生物群落构成、分布特征以及四周内的动态变化进行了初步分析。结果显示:绝经后妇女阴道乳酸杆菌并未减少或消失,而是依然广泛且密集地存在于阴道内,构成了微生物群落的主要部分,并影响微生物群落整体的结构和功能,发挥着保护性作用。绝经后妇女由于内在机能的转变,使得阴道菌群得以处在相对稳定的生态环境中,避免了健康群落的破坏和崩溃;(2)接着,我们又分析了30例萎缩性阴道炎患者阴道群落特征,并与正常绝经后妇女进行比较;继而给予口服小剂量雌激素治疗,揭示用药期间其阴道微生物群落的动态变化;然后通过生物信息深度挖掘和翻译,初步筛选与萎缩性阴道炎相关的风险菌和有益菌。我们的研究发现:绝经后正常女性阴道微生物群落组成结构与萎缩性阴道炎患者差异显著。其中,加德纳菌和奇异菌属与绝经后妇女生殖道萎缩症状的严重程度有关。对于绝经后女性而言,处于生物优势地位的乳酸杆菌在维持阴道健康方面起到更为重要的作用。给予小剂量雌激素治疗后,乳酸杆菌显著增加,阴道微生物群落的生物多样性明显降低,患者阴道群落的组成结构转化接近正常妇女水平;(3)最后,我们通过建立阴道上皮的体外模型,以不同浓度的阴道奇异菌和弯曲乳酸杆菌为刺激物,并给予不同雌激素环境共培养,采用ELISA法测定不同实验条件下炎性细胞因子和趋化因子的分泌水平。结果显示:阴道奇异菌以剂量依赖方式触发阴道上皮分泌IL-6和IL-8(P<0.05),而弯曲乳酸杆菌不引起任何阴道黏膜固有免疫反应。而在雌激素作用下,阴道奇异菌诱导的固有免疫反应受到显著减弱和抑制。在大多数绝经后正常妇女,乳酸杆菌优势的阴道微生物群落依然发挥保护性作用,同时群落结构和功能保持相对稳定,维持着健康的平衡。当群落失去优势乳酸杆菌的控制,尤其是加德纳菌或奇异菌丰度的增加时,会触发阴道上皮炎性细胞因子IL-6和趋化因子IL-8的异常分泌,罹患萎缩性阴道炎的风险增加。给予雌激素治疗后,阴道微生物群落显示出显著的反应性变化,乳酸杆菌优势的群落特征得到重建,群落物种多样性降低,形成稳定阴道微生态环境,同时奇异菌丰度诱发的固有免疫反应得到雌激素的有益调节,阴道健康得到有效恢复和维持。