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ADAM17是一种含去整合域和金属蛋白酶域的蛋白,活化的ADAM17的主要功能在于能够剪切许多跨膜细胞因子(如TGF-α、HB-EGF等)、生长因子的细胞外功能区,使其成为游离的活性形式,有活性的细胞因子能够激活相应的受体,并通过下游的信号转导通路发挥生物学作用。在前列腺癌细胞中,TGF-α能与细胞表面的表皮生长因子受体(EGFR)结合,形成自分泌环,参与调节转录因子的活性和细胞增生等细胞行为。而在前列腺癌细胞中,ADAM17与TGF-α、EGFR的关系未见报道。
为检测和证明前列腺癌细胞中ADAM17的表达与TGF-α、EGFR活化相关,本研究采用不同浓度的金属蛋白酶的抑制剂GM6001及设计、合成的三种特异的ADAM17-siRNA处理ADAM17表达高DU145细胞,使ADAM17的表达下降,并进一步检测TGF-α的活化及EGFR的磷酸化情况:然后在ADAM17-siRNA组添加外源性TGF-α,检测DU145细胞EGFR、pEGFR的表达。
结果显示,ADAM17的沉默抑制了TGF-α外功能区的剪切,并导致了EGFR磷酸化的减少;在ADAM17-siRNA处理的DU145细胞中添加外源性TGF-α,结果显示恢复了EGFR的磷酸化,表明ADAM17的沉默不能影响受体被相应配体激活的功能。
以上结果表明在前列腺癌细胞中ADAM17能够剪切跨膜蛋白TGF-α,使之从细胞膜上脱落而被活化,进而激活EGFR;并且ADAM17对前列腺癌细胞中TGF-α的活化是EGFR激活所必需。