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鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis, IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus, IBV)所引起的一种急性、高度接触性的动物传染病。IB主要损害鸡的呼吸系统、消化系统和生殖系统,引起呼吸困难、肾脏病变和产蛋下降等症状,并且发病率和死亡率较高,严重影响着鸡养殖业的健康发展。为建立IBV的快速检测方法,本研究在IBV基因序列的分子生物学信息收集与分析的基础上,进行引物设计,分别对IBV的RT-PCR和RT-LAMP检测方法进行了研究,为IBV感染的临床诊断提供了可靠的检测技术手段。根据GenBank已发表IBV的M基因的序列,设计合成2条引物,通过IBV-pMD19-T重组质粒的构建、反应条件的优化、以及检测方法的敏感性试验和特异性试验,建立了IBV的RT-PCR检测方法,并在临床检测中进行了初步应用。结果显示:建立的RT-PCR可扩增出271bp大小的特异性目的基因片段,具有良好的特异性和敏感性。其敏感性可达到60个拷贝的目的基因片段,MDV、NDV、支原体等常见病原核酸扩增均为阴性。对于25份临床样品的检测结果表明4份为IBV核酸阳性,阳性率达16%。根据IBV的M基因设计合成6条引物,通过反应条件的优化、敏感性试验和特异性试验,对IBV的RT-LAMP检测方法进行了初步研究。结果建立的RT-LAMP检测方法在63℃,45min条件下,扩增产物的琼脂糖核酸凝胶电泳显示大于160bp的特异性梯带状目的基因条带,其检测极限比建立的RT-PCR更高,可达到6个拷贝的目的基因片段,MDV、NDV、原体等常见病原核酸扩增均为阴性,具有良好的特异性和敏感性。