本研究将含有vip3A杀虫基因的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）和具有内生及防病等优良特性的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）进行原生质体融合，希望得到具有双亲优良特性于一体的工程菌。通过筛选最终得到一株具有杀虫、防病及内生性均较强的多功能融合子。本研究包括以下四部分：一、对BS-2和WB₇菌株进行诱导抗性和拮抗作用测定；二、测定亲本菌株原生质体形成和再生的酶解条件；三、在PEG6000和Ca⁺²存在下进行原生质体融合及可稳定遗传融合子的筛选；四、稳定遗传融合子的生物学特性的测定。 通过传代实验检查发现，诱导后的亲本菌株均有稳定的抗药性，同时诱导后的亲本菌株对黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f．sp．cucumerinum）的拮抗作用测定表明：未诱导的亲本菌株BS-2及其诱导的抗利福平菌株均具有很强的抗菌能力，诱导后其抗菌作用和菌落形态没有改变；而菌株WB₇在诱导前对黄瓜枯萎病菌有微弱的拮抗作用，诱导的抗卡那霉素菌株则不表现拮抗作用。同时还将诱导前后BS-2和WB₇菌株的拮抗作用进行对比，结果显示它们对黄瓜枯萎病菌的拮抗作用差异很明显。 原生质体最佳制备条件因菌株不同而有很大的区别，试验结果表明，亲本菌株的原生质体形成率随酶解浓度和酶解时间的延长而增加，但再生率却下降。综合以上的情况，为了达到最佳的酶解和再生率，本实验将WB₇^kan和BS-2^rif的酶解浓度分别定为0.76mg／ml和1.15 mg／ml，在这种酶解条件下WB₇^kan的原生质体形成和再生率分别为95.5％和11.3％，而BS₂^rif的为96.77％和10.5％。 在PEG6000存在下进行亲本原生质体融合，在双抗培养基中筛选得到了97株融合子，将它们在双抗培养基中传代培养后，得到了11株可以在双抗培养基中稳定遗传的融合子，11株融合子对黄瓜枯萎病菌拮抗作用测定表明，其中只有6株具有较强拮抗作用的融合子。 经对这6株可稳定遗传的融合子对小菜蛾杀虫活性的测定和vip3A基因的PCR检测后，得到了3株具有杀虫活性及含有vip3A基因的融合子，并分别被命名为YB₁、YB₂和YB₃，它们对小菜蛾分别有62％、65％描建农林人学硕士学位论义再经过内生定殖检测，最终只有融合子YB:具有和68.3%的杀虫效果。很强的内生能力。