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目的本实验旨在探究亚低温联合红景天苷对全脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的保护作用及机制,为其临床应用提供实验依据。研究方法按照随机数字表法将90只雄性SD大鼠随机分为5组(n=18):(1)假手术组(Sham组):仅暴露双侧翼孔,分离双侧颈总动脉,并于手术后注射0.9%氯化钠溶液;(2)模型组(GCI/R组):参照Pulsinelli四血管阻断法制备全脑缺血再灌注模型,脑缺血10分钟后进行再灌注,于再灌注前向大鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液;(3)亚低温治疗组(MH组):制备全脑缺血再灌注模型,于再灌注前向腹腔注射0.9%氯化钠溶液并给予亚低温(33±0.5℃)干预治疗,用冰袋及加热垫维持低温3h;(4)红景天苷治疗组(Sal组):制备全脑缺血再灌注模型,于再灌注前给予红景天苷(20mg/kg)干预治疗;(5)亚低温联合红景天苷治疗组(MH+Sal组):制备全脑缺血再灌注模型,并于再灌注前给予亚低温及红景天苷(20mg/kg)干预治疗,低温持续3h。Sham组、GCI/R组及MH组注射的0.9%氯化钠溶液与Sal组、MH+Sal组注射的红景天苷溶液体积相同。大鼠首次腹腔注射0.9%氯化钠溶液或红景天苷后,每24h注射一次,直至再灌注后72h。全脑缺血再灌注72h后,根据Geocadin制定的神经功能缺损评分量表(neurologic deficit scale,NDS)对各组大鼠进行神经功能缺损评分,采用HE染色法评价各组大鼠脑组织细胞的形态学变化,采用干湿重法检测脑组织含水量,伊文思蓝法测量血脑屏障的通透性,WST-8法测量SOD活力,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,DHE染色法检测ROS含量,Western blot法检测MMP9、claudin5及occludin表达水平。结果(1)与Sham组相比,GCI/R组大鼠的NDS评分明显下降(P<0.001),显微镜下可观察到明显的脑组织细胞病理性改变,脑含水量显著增加(P<0.001),血脑屏障通透性增加(P<0.001),SOD活性降低,ROS及MDA含量明显增多(P<0.001),MMP9表达上调,claudin5、occludin表达量减少(P<0.001);(2)各治疗组与GCI/R组相比,NDS评分出现不同程度的升高,显微镜下可见脑组织病理性改变得以改善,脑含水量及血脑屏障通透性降低,SOD活力增加,ROS及MDA含量降低,MMP9表达量减少,claudin5、occludin表达量增多;其中,MH+Sal组各指标变化最为显著。结论亚低温联合红景天苷能够减轻全脑缺血再灌注导致的血脑屏障损伤,减轻血脑屏障损伤造成的脑水肿、组织病理性改变及神经功能障碍。这可能与其抑制氧化应激反应,减少ROS生成,继而减少MMP9表达量及紧密连接蛋白claudin5、occludin的降解有关。