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肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)个体之间发病率及疾病进程的不同,提示遗传因素在HCC发生发展过程中至关重要。目前有研究证实PNPLA3rs738409[G](编码:I148M)位点多态性和许多疾病所致的HCC相关联,但是PNPLA3 I148M基因多态性是否是导致HCC的独立因素,如何引起肝脏损伤的机理目前仍不明确。本课题通过人群水平、细胞水平及分子水平系统地探讨了PNPLA3 rs738409多态性位点对HCC的作用及可能的作用机制,以期验证PNPLA3 rs738409多态性位点与青岛汉族人群中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关HCC的相关性,进而阐明此多态性及相关的遗传因素对HBV相关性HCC患者的影响。首先,本文在人群水平研究了青岛地区汉族人群中PNPLA3 I148M基因多态性与HBV相关性HCC的相关性。临床收集了230例HBV相关性HCC患者及219例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者的血液样本并进行PNPLA3基因型检测及相关分析,同时选取254例健康人群作为对照组,同时进行相关检测。结果提示,PNPLA3 rs738409 G等位基因的频率分布在HCC组为24.3%,CHB组为12.8%,健康对照组为7.17%,各组间比较时均有明显差异(P<0.05)。非条件Logistic回归分析显示,与携带CC基因的人群相比,携带G基因的人群发生HCC的比值比(OR)是3.974(95%CI:2.712-5.824,P=0.000),发生CHB的OR为1.700(95%CI:1.179-2.451,P=0.004)。调整性别、年龄因素后,发生HCC的OR为4.099(95%CI:2.783-6.036,P=0.000),发生CHB的OR为1.709(95%CI:1.182-2.471,P=0.004)。HCC组中,血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、总胆固醇、总胆汁酸水平在突变型基因组高于野生型CC基因组(P<0.05)。CHB组中,血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、甘油三酯、总胆固醇、总胆汁酸水平在突变型基因组高于野生型CC基因组(P<0.05)。上述的结果提示,青岛的汉族人群中,PNPLA3 rs738409[G]I148M基因多态性与HCC及CHB的发生发展相关,与肝脏损伤相关。其次,本文通过体外实验,在细胞和分子水平对PNPLA3 I148M的作用机制进行探讨。在成功构建PNPLA3野生型及I148M突变型慢病毒过表达载体后分别转染肝癌细胞株Hep G2.2.15,对HBV DNA表达量、促炎因子IL-8及抑癌基因p53在m RNA及蛋白水平的表达差异分别进行检测。研究结果显示PNPLA3蛋白在野生型及突变型中都表现为过表达。PNPLA3 I148M突变组HBV DNA病毒载量及IL-8表达高于对照组及野生型组,但无统计学差异(P>0.05),提示PNPLA3I148M对HBV病毒载量和IL-8表达无显著性影响。然而p53的表达在m RNA及蛋白水平均显著升高。研究结果提示,PNPLA3 I148M基因多态性可通过调节抑癌基因p53的表达对肝癌细胞产生影响。更为深入的作用机制则需要进一步的研究探讨,从而为日后开展HBV防治的个体化精准医疗提供基础数据支持。