X射线辐射对药物代谢酶CYP1A2和CYP2E1活性及蛋白和mRNA表达的影响

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目的:将辐射与药物代谢相结合,研究X射线辐射对药物代谢酶CYP1A2、CYP2E1活性及蛋白和mRNA表达的影响。方法:SD大鼠随机分为CYP1A2组和CYP2E1组两大组,每一大组随机分成三小组,分别为对照组、低剂量辐射组(1 Gy)和高剂量辐射组(5 Gy)。采用美国Va Rian 23EX医用电子直线加速器6MV X-Rays全身一次性照射进行造模,造模后采用Cocktail法分别选取CYP1A2和CYP2E1的探针药物咖啡因和氯唑沙宗,用探针药物的药代动力学变化来评价CYP1A2和CYP2E1的酶活性。探针药物单次灌胃给药后CYP1A2组在0.083、0.167、0.333、0.5、1、2、4、6、8、12 h时间点,CYP2E1组在0.083、0.167、0.333、0.5、1、2、4、6、8、10 h时间点眼底静脉采血,用HPLC法测定大鼠血药浓度。采用DAS 2.0药代动力学软件以非房室模型计算对照组、低剂量辐射组和高剂量辐射组探针药物药代动力学参数,评价X射线对CYP1A2和CYP2E1活性的影响。测定X射线辐射后各组大鼠胸腺、脾脏指数及血红蛋白(HGB)、白细胞(WBC)、总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)等生理生化指标的变化。分别采用ELISA和qPCR法测定大鼠肝脏CYP1A2和CYP2E1蛋白和mRNA的表达,评价X射线对两种酶蛋白和mRNA表达的影响。结果:X射线辐射条件下,低、高剂量辐射组胸腺指数和脾脏指数明显小于对照组,胸腺指数分别降低了41.8%和72.8%(P<0.05),脾脏指数分别降低了19.9%和56.8%(P<0.05)。血常规指标显示,与对照组相比,低、高剂量辐射组红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)无显著变化,但白细胞(WBC)分别降低了26%和61%(P<0.05),血小板数(PLT)分别增加了149%和87%(P<0.05)。生化指标结果为高剂量辐射组碱性磷酸酶(ALP)与对照组相比下降了39.6%(P<0.05),低剂量辐射组无显著性差异。与对照组相比,低、高剂量辐射组大鼠总蛋白(TP)分别增加了15.3%和14.1%(P<0.05),球蛋白(GLO)分别增加了26.7%和20.7%(P<0.05)。X射线辐射后,大鼠CYP1A2的活性明显升高,探针药物咖啡因的药代动力学参数发生明显变化,与对照组相比,低剂量辐射组和高剂量辐射组的t1/2分别显著减少了24.7%和41.1%(P<0.05),MRT0-t分别减少了10.7%和33.1%(P<0.05),AUMC0-t分别显著减少了40.4%和60.2%(P<0.05),Cmax分别显著减少了32.7%和48.1%(P<0.05)。X射线辐射后,大鼠CYP2E1的活性也明显升高,低剂量辐射组和高剂量辐射组与对照组相比,探针药物氯唑沙宗的CL分别升高了44.1%和90.5%(P<0.05),AUC0-t分别显著降低了29.7%和90.5%(P<0.05),AUC0-∞显著降低了28.4%和43.2%(P<0.05),Cmax降低了32.7%和48.1%(P<0.05)。X射线辐射使大鼠CYP1A2和CYP2E1的蛋白表达显著升高。与对照组相比,低、高剂量辐射组的CYP1A2蛋白表达分别显著升高了28.3%和38.9%(P<0.05)。与对照组相比,高剂量辐射组的CYP2E1蛋白表达显著升高了48.4%(P<0.05),低剂量辐射组的CYP2E1的蛋白表达虽无显著变化,但有升高的趋势。X射线辐射后,大鼠CYP1A2和CYP2E1的mRNA表达显著升高。与对照组相比,高剂量辐射组的CYP1A2 mRNA表达显著升高了856%(P<0.05),低剂量辐射组CYP1A2的mRNA表达虽无显著变化,但有升高的趋势。与对照组相比,低、高剂量辐射组的CYP2E1 mRNA表达分别显著升高了89%和192%(P<0.05)。结论:X射线辐射使大鼠的生理生化指标发生一定变化。X射线辐射后,大鼠CYP1A2和CYP2E1活性显著提高,蛋白及mRNA表达显著增加。
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