高糖和高胰岛素对MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白表达和功能的影响

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:Linda_724
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目的:检测MCF-7/ADR细胞中P-糖蛋白存在的情况,分析高糖、高胰岛素对P-糖蛋白表达和功能的影响,对糖尿病乳腺癌患者化疗耐药情况进行初步探讨。方法:用不同糖浓度和不同胰岛素浓度的全细胞培养基培养MCF-7/ADR细胞,分别采用Real-time PCR法检测细胞中Mdrl mRNA的表达量和Western Blot法检测细胞中P-糖蛋白含量,以及罗丹明123荧光实验测定目的蛋白的功能变化。同时,用荧光显微镜检测以上实验的葡萄糖浓度是否能够可以引起细胞凋亡,以排除凋亡对目的蛋白表达的影响。结果:(1)Mdrl mRNA的相对表达量随葡萄糖浓度的增加,在11.1mmol/1明显增高,此后又迅速降低,11.1-27.8mmol/葡萄糖浓度组与5.6mmol/葡萄糖浓度组比较,Mdrl的表达量均存在显著差异;Mdrl mRNA的表达量随果糖浓度的增加,在5.6-16.7mmol/果糖浓度组之间逐渐降低,在22.2、27.8mmol/果糖浓度组又逐渐增高,11.1-27.8mmol/果糖浓度组的表达量与5.6mmol/果糖浓度组比较,差异均有统计学意义;Mdrl表达量随细胞培养基中胰岛素浓度的增加,逐渐降低,0.005-0.01μmol/1胰岛素浓度组与不含胰岛素组比较,两组Mdrl mRNA的表达量存在统计学差异。(2)P-糖蛋白表达量随葡萄糖浓度的增高而变化,先增高(11.1mmol/1),后逐渐减低(16.7-27.8mmol/l).5.6mmol/l葡萄糖浓度组P-糖蛋白表达量明显高于16.7-27.8mmol/l葡萄糖浓度组(P<0.001);P-糖蛋白表达量随胰岛素浓度的增高,逐渐减低。且0,0.001μmol/1胰岛素浓度组的P-糖蛋白表达水平明显高于0.005和0.01μmol/l胰岛素浓度组(P<0.001)。(3)P-糖蛋白功能随葡萄糖和胰岛素浓度的增高,逐渐降低,降低程度明显,存在统计学差异。结论:高浓度葡萄糖和胰岛素可使MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白的表达和功能产生变化,影响糖尿病乳腺癌患者化疗耐药性。但其分子机制还有待于进一步研究。
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