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背景:B7-H4是T细胞的独特负性调节因子,通常在各种癌细胞上明显过表达。尽管很多研究表明B7-H4在多种癌症中的表达上调并与其不良预后相关,但其对结直肠癌进展的影响尚不完全清楚。目的:通过检测B7-H4在结直肠癌组织标本中的表达水平,分析其与患者临床病理参数之间的相关性,探讨B7-H4与上皮-间质转化（Epithelial–mesenchymal transition,EMT）之间的关系,并进一步通过体外实验阐明B7-H4在结直肠癌细胞增殖、转移与侵袭过程中的作用及可能的分子机制,为B7-H4作为结直肠癌临床治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法:1.数据库及组织标本分析:通过UALCAN数据库分析B7-H4在结直肠癌组织和正常组织中m RNA水平的表达情况;免疫组织化学方法分析B7-H4在98例结直肠癌患者中的临床病理学意义,卡方检验分析其表达与患者临床病理参数之间的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线和Cox比例风险模型分析B7-H4的表达在结直肠癌患者临床预后评估中的意义。2.细胞实验:平板克隆、细胞增殖实验（Carboxy-fluorescein succinimidyl ester,CFSE）染色、观察B7-H4在结直肠癌增殖的作用;划痕及Transwell实验观察B7-H4对细胞迁移和侵袭能力的影响;western blot检测B7-H4转染前后对上皮间质转化、肿瘤干细胞标志物相关蛋白表达变化;免疫荧光染色法观察B7-H4、EMT相关蛋白、CD133、CD44和GLI1（Glioma-associated oncogene homolog 1）的定位及表达情况。SPSS 25.0与Graph Pad Prism 9.0进行统计分析。结果:1.B7-H4高表达与结直肠癌患者的不良预后密切相关:与正常组织比,B7-H4 m RNA水平在结直肠癌中表达增高;病理参数相关性分析显示,B7-H4蛋白高表达与癌症的淋巴结转移与临床分期密切相关;Kaplan-Meier分析显示其高表达预示结直肠癌患者的不良预后。2.B7-H4促进结直肠癌细胞增殖:通过平板克隆实验和细胞增殖实验发现,B7-H4高表达可促进结直肠癌细胞的增殖能力。3.B7-H4通过诱导EMT增强结直肠癌细胞的侵袭与迁移能力:划痕及Transwell实验表明B7-H4高表达显著增强结直肠癌细胞的迁移、浸润能力;B7-H4沉默可显著上调上皮标志物表达（E-cadherin）,下调间质标志物（vimentin）表达。4.B7-H4的表达与结直肠癌肿瘤干细胞特性标志物相关:在临床结直肠癌组织标本和细胞中,B7-H4和肿瘤干细胞标志物CD133和CD44均共定位;B7-H4沉默后,CD133和CD44表达下调。5.GLI1影响结直肠癌中B7-H4的表达:免疫组织化学和免疫组织荧光染色结果显示,B7-H4与GLI1在结直肠癌组织和细胞中共定位。结论:B7-H4高表达与结直肠癌患者淋巴结转移、临床分期密切相关,并预示结直肠癌患者的不良预后;B7-H4高表达促进结直肠癌的增殖、侵袭迁移以及EMT发生;B7-H4的表达与结直肠癌肿瘤干细胞特性标志物相关;结直肠癌中GLI1与B7-H4之间存在相关性。