论文部分内容阅读
研究首先建立了EPR在牦牛血浆与牛奶中荧光高效液相色谱的检测方法,EPR在牦牛血浆的检测限(LOD)与定量限(LOQ)分别为0.01与0.15ng；在牦牛奶中的LOD与LOQ为0.08与0.20 ng。EPR在牦牛血浆中的添加水平为5,20和40 ng-ml-1时,平均回收率在98.4%～101.5%之间,批内变异系数范围在4.2%～6.7%,批间变异系数为2.3%～5.7%；在牦牛奶中的添加水平为5,20和40 ng-ml-1时,平均回收率在96.5%～102.4%之间,批内变异系数范围在2.7%～3.5%,批间变异系数为0.5%～8.1%。用已建立的方法对EPR在牦牛血浆中的药物动力学进行研究,并对国产制剂与进口制剂进行了生物等效性评价。结果表明,以0.5 mg-kg-1剂量对牦牛使用EPR浇泼剂后,国产药物的受试组与进口药物的对照组在牦牛的血浆中,分别于1.67±0.2d与1.83±0.61 d (Tmax)在血浆中达到最高药物浓度(Cmax)7.88±2.68与5.94±2.80 ng-ml-1,吸收半衰期分别为3.54±1.26与4.95±2.36d,消除半衰期分别为10.80±1.62与4.88±1.00d,曲线下面积(AUC)为87.99±27.18与62.25±14.24ng·d·ml-1,平均滞留时间(MRT)为15.12±2.77与11.38±3.25d,对AUC、Cmax与Tmax进行生物等效性分析证明上述两种EPR制剂是生物等效的。在药物动力学研究的同时进行了牦牛奶中EPR残留消除规律研究。国产EPR浇泼剂与进口制剂在牦牛奶中,分别于2.40±0.89与3.00±2.53d达到最高残留浓度4.52±2.58与1.97±0.94 ng·ml-1,消除半衰期分别为8.01±5.73与5.69±2.42d, AUC分别为32.96±19.66与14.71±6.26 ng·d·ml-1,MRT为11.08±3.72与9.75±2.86d,奶/血分配系数为0.38±0.23与0.2±0.08。使用EPR浇泼剂后,牦牛奶中检测到的最高药物浓度为8.46 ng·ml-1,没有超过联合国粮食与农业组织(FAO)所规定的最高残留限量20μg-kg-1,EPR浇泼剂可以0.5 mg·kg-1的推荐剂量用于牦牛而无需弃奶期。研究随后建立了牦牛组织中EPR残留检测的荧光高效液相色谱法。EPR在牦牛肌肉组织中的LOD和LOQ分别为0.01和0.15ng·g-1,添加水平为1,20和40ng·g-1时,平均回收率在102.39%～108.93%之间,批内变异系数范围在1.35%～5.82%,批间变异系数为4.09%～15.41%；EPR在牦牛肝脏组织中的LOD和LOQ分别为0.10和0.35ng·g-1,添加水平为1,40和100ng·g-1时,平均回收率在96.76%～97.78%之间,批内变异系数范围在2.22%～4.68%,批间变异系数为4.23%～15.07%；EPR在牦牛肾脏组织中的LOD和LOQ分别为0.08和0.20ng·g-1,以1,40和100ng·g-1浓度水平添加时,平均回收率在91.60%～97.07%之间,批内变异系数范围在1.26%～5.31%,批间变异系数为2.15%～3.19%；EPR在牦牛脂肪组织中的LOD和LOQ分别为0.10和0.35ng·g-1,以1,40和100ng·g-1浓度水平添加时平均回收率在96.12%～97.42%之间,批内变异系数范围为1.99%～4.78%,批间变异系数为2.04%～8.92%。用已建立的方法对国产EPR浇泼剂在牦牛组织中的残留消除规律进行了研究,对牦牛浇泼部位肌肉、后腿肌肉、肝脏、肾脏和脂肪样品进行残留检测分析。牦牛组织中EPR于2d达到Cmax 5.00～1050.50 ng·g-1, AUC范围在54.81～1506.76 ng·d-g-1,MRT为8.06～11.60d,消除半衰期2.07～10.11d。实测数据使用WT1.4计算软件拟合,肝脏、肾脏的休药期分别为8.94d与9.61d,肌肉与脂肪组织无需休药期。牦牛按推荐剂量0.5 mg·kg-1给予EPR浇泼剂后,建议休药期至少为10d。本研究最后进行了国产EPR浇泼剂对牦牛牛皮蝇蛆、牛颚虱和消化道线虫的疗效试验。EPR以0.5 mg·kg-1推荐剂量对牦牛浇泼给药,对上述寄生虫的驱杀效率均为100%。对牛颚虱与牦牛体内消化道线虫持效期至少为28d。