新疆是我国重要的畜牧生产基地,也是我国重要的羊毛和优良种畜产地。由于新疆的自然条件和社会条件以及民族习俗的影响,形成了以草食家畜为主的养殖格局,其中尤以养羊业为重,绵羊分布十分广泛,品种众多,随着西部大开发的深入,如何准确评估新疆绵羊的系统地位及应用前景、合理布局畜牧业就成为影响我区,乃至整个畜牧业的关键问题。新疆军垦型细毛羊基因组细菌人工染色体(BAC)文库的构建以及绵羊20号染色体MHC基因邻近区段相关位点的研究是一项以基因重组技术为核心的基础性研究项目。 构建一个物种的全基因组高密度物理图谱,在某种程度上代表着一个国家在生物高技术领域的研究水平和实力,人类基因组计划就是一个成功的范例和证明。目前绵羊基因组测序计划得到的基因组图谱还存在很大的缺口,这就需要利用其他尚未用于基因组测序的BAC文库来补足缺口。因此,构建新疆军垦型细毛羊基因组BAC文库及20号染色体特定基因组区段相关位点的研究,不仅为新疆军垦型细毛羊高分辨率物理图谱的构建提供技术平台,而且也填补了国内在细毛羊研究领域的空白,将在很大程度上推进我国细毛羊全基因组的研究和应用进程,为世界细毛羊的功能基因定位及全基因组高密度物理图谱的构建提供研究基础,在动物生命科学研究的各个领域产生深远影响。 本项目围绕新疆军垦型细毛羊20号染色体MHC基因邻近区段相关位点的研究,构建了中国特有的地方培育品种新疆军垦型细毛羊基因组BAC文库,为后续研究工作包括MHC功能基因的研究及高分辨率物理图谱的构建提供了极有价值的资源。对所选取的分子标记使用了所构建的2倍基因组文库PCR筛选系统进行了阳性克隆的筛选,并对相关位点进行了PCR产物的扩增、序列测定和同源性比对,研究中涉及到了一整套分子生物学技术的集成与组合,检测后的文库具有较高的质量,符合国际建库标准,为今后工作的进一步延伸奠定了基础。本研究所取的的结果如下: (1) 本研究的基因组来自中国特有的地方培育品种新疆军垦型细毛羊,所构建的基因组文库,含有190,464个克隆,比其他文库的克隆数多,从本文库的平均插入片段大小133kb来看,比国际上其他的绵羊BAC文库所插入的片段大小略长,同时文库92.5%