【摘 要】
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目的:建立不同类型噪声所致的C57BL/6N小鼠听力损失模型,探讨不同类型噪声对听功能的影响以及与毛细胞损伤的关系,为后续进一步研究NIHL的发病机制,筛选听觉相关保护药物,基因治疗及毛细胞再生等提供必要的实验模型及理论依据。方法:本实验选取4周龄C57BL/6N雄性小鼠作为实验对象,首先对小鼠听力进行评估,挑选30只听阈正常的小鼠并进行随机分组,共分为6组,每组5只小鼠。分组如下:control
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目的:建立不同类型噪声所致的C57BL/6N小鼠听力损失模型,探讨不同类型噪声对听功能的影响以及与毛细胞损伤的关系,为后续进一步研究NIHL的发病机制,筛选听觉相关保护药物,基因治疗及毛细胞再生等提供必要的实验模型及理论依据。方法:本实验选取4周龄C57BL/6N雄性小鼠作为实验对象,首先对小鼠听力进行评估,挑选30只听阈正常的小鼠并进行随机分组,共分为6组,每组5只小鼠。分组如下:control组,为正常对照组,不予噪声暴露;100dB 3h组,采用100dB SPL白噪声暴露3h;120dB 3h组,采用120dB SPL白噪声暴露3h;112dB 3h组,采用112dB SPL 8-16k Hz倍频带噪声暴露3h;112dB 6h组,采用112dB SPL 8-16k Hz倍频带噪声暴露6h;112dB 9h组,使用112dB SPL8-16k Hz倍频带噪声暴露9h。control组不予处理直接放回动物房饲养,5个实验组分批进行噪声暴露。于噪声暴露后第4天、第7天、第14天进行ABR检测,刺激声为click和tone burst,tone burst的检测频率包含4k Hz、8k Hz、16k Hz、24k Hz。第14天听力检测结束后,处死小鼠,观察毛细胞形态并计数。结果:1.正常C57BL/6N小鼠click与TB 4k Hz听阈分别为22.0±3.3 dB SPL、17.5±2.5 dB SPL;TB 8k Hz与TB 16k Hz听阈较click听阈低（p<0.01）,分别为15.5±1.5 dB SPL、11.0±2.0 dB SPL;TB 24k Hz听阈较click听阈高（p<0.01）,为33.0±4.6 dB SPL。2.100dB白噪声暴露3h对C57BL/6N小鼠的click及不同频率tone burst的听阈影响有所不同。对click及TB 4k Hz的听阈未产生明显影响（p>0.05）。TB 8k Hz、TB 16k Hz和TB 24k Hz均在NE-4d时听阈升高（p<0.01）,TB 16k Hz的阈移最大,TB 8k Hz和TB 24k Hz的阈移次之,噪声暴露7天后听阈便恢复正常。3.120dB白噪声暴露3h后,小鼠click及不同频率tone burst听阈均明显升高,且NE-14d时仍未恢复。click、TB 8k Hz和TB 24k Hz的阈移在NE-4d、NE-7d和NE-14d时无明显变化,TB 4k Hz的阈移程度在NE-4d时最大,TB 16k Hz阈移在NE-14d时最大。TB 4k Hz的阈移与click的阈移相似,TB 8k Hz、TB 16k Hz、TB 24k Hz阈移较click阈移更大（p<0.01）,TB 16k Hz阈移最大,TB 8k Hz和TB 24k Hz阈移次之。TB 8k Hz I波潜伏期延长。4.112dB 3h组、6h组和9h组小鼠在8-16k Hz倍频带噪声暴露后,听力几乎完全丧失,且为不可逆性。5.100dB 3h组小鼠耳蜗顶、中、底回的3排外毛细胞和1排内毛细胞均排列整齐,无明显缺失。6.120dB 3h组小鼠内毛细胞未出现明显损伤,顶回外毛细胞未见明显损伤,中回外毛细胞出现轻微移位,底回外毛细胞缺失较为明显。7.112dB 3h组和6h组小鼠内毛细胞均未出现明显损伤;112dB 9h组小鼠内毛细胞出现损伤,底回缺失最多,中回次之,顶回出现移位。112dB 3h组、6h组和9h小鼠外毛细胞出现不同程度的损伤,均以底回损伤最重,中回次之,顶回最轻,9h组小鼠耳蜗毛细胞损伤最重,6h组次之。结论:1、100dB宽频带白噪声暴露3h仅引起C57BL/6N小鼠出现暂时性阈移,在噪声暴露后第7天基本恢复,暂时性阈移与毛细胞损伤无关。2、120dB宽频带白噪声暴露3h导致C57BL/6N小鼠出现永久性阈移,但尚有部分听力残余,底回外毛细胞出现缺失,内毛细胞无明显缺失。3、宽频带白噪声对8k Hz-24k Hz听力的影响更大。4、112dB 8-16k Hz倍频带噪声暴露3h、6h和9h均导致C57BL/6N小鼠听力完全丧失,且为不可逆性永久性阈移。随着噪声暴露时间的增加,对毛细胞的损伤程度加重,损伤范围扩大。5、永久性阈移与毛细胞损伤有关。6、相同强度的噪声中,8-16k Hz倍频带噪声对听力的损害较白噪声强。
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