一目的：现有的实验表明有效的外源性P物质（substanceP，SP）浓度可以刺激体外成纤维细胞的增殖，而瘢痕增生以成纤维细胞增殖为主要，并且在以往研究中证实FAK、PKB以及NF-κB蛋白在增生性瘢痕中表达明显增加，因此我们推测，外源性P物质有可能作为一种重要的物质对激活各种信号转导途径有着重要作用，本实验探讨不同浓度外源性P物质对成纤维细胞增殖影响及外源性P物质与黏着斑激酶（focaladhesionkinase，FAK）、蛋白激酶B（ProteinkinaseB，PKB）、核因子（nuclearfactorκB，NF-κB）在瘢痕形成中的关联性及时效性，旨在为今后的临床治疗提供实验参考依据。二方法：1．实验方法：选择CCC-ESF-1人胚胎成纤维细胞进行常规培养，取细胞系的对数期细胞进行不同SP浓度干预，采用MTT法观察SP对成纤维细胞活性的影响，在酶联免疫检测仪上测定各孔光密度值（opticaldensity，OD值），通过细胞计数，绘制细胞生长柱状图探讨SP对成纤维细胞增殖的影响；采用SP浓度为1×10^-6 mol/l的溶液刺激成纤维细胞，分别在0min，15min，30min，60min用Westernblot实验方法检测成纤维细胞中FAK蛋白、PKB蛋白以及NF-κB蛋白的表达情况。2.统计方法：MTT实验结果用平均数和标准差来表示，western-blot实验所得各项指标的数据资料用均数±标准差（x±s）表示，组间资料统计用单因素方差分析（ANOVA）检验。上述过程均使用SPSS13.00统计软件处理。P＜0.05为有统计学意义。三结果：1．MTT结果显示，用不同浓度的SP刺激成纤维细胞增殖，剂量从1×10^-8mol/l到1×10^-5mol/l，随浓度的变化，各组与对照组相比有显著的统计学差异，提示SP促进成纤维细胞的增殖具有一定的浓度依赖性，结果表明随SP浓度的增高，其促进成纤维细胞增殖的能力越强。2．Western-blot的结果:结果显示，当1×10^-6 mol/lSP作用于成纤维细胞0min时FAK、PKB、NF-κB即有少量活性，15min时活化水平增加，至30min时活化最明显，达到高峰，然后逐渐下降，持续至少达60min。且在不同时间点表达差别有统计学意义（F=8.259，P＜0.001；F=36.674，P＜0.001；F=41.472，P＜0.001）。1)SP刺激后不同时相点HSFb中FAK的活化水平：FAK相对灰度值与0min相比较，15min，30min，60min分别比0min上升了39.2%（P＜0.05），73.9%（P＜0.05）和38.5%（P＜0.05）。30min与15min相比较，表达水平显著上升了24.9%（P＜0.05），60min与30min相比较下降了20.3%（P＜0.05），表达水平有明显变化，差别有统计学意义（P＜0.05）。2)SP刺激后不同时相点HSFb中PKB的活化水平：PKB相对灰度值与0min相比较，15min，30min，60min分别上升了29.0%（P＜0.05），76.5%（P＜0.05）和44.7%（P＜0.05），差别均有统计学意义（P＜0.05）。30min与15min相比较，表达水平显著上升36.8%（P＜0.05），差别有统计学意义，60min与30min相比较下降了18.0%（P＜0.05），表达水平有明显变化，差别有统计学意义（P＜0.05）。3)SP刺激后不同时相点HSFb中NF-κB的活化水平：NF-κB相对灰度值与0min相比较，15min，30min，60min分别比0min上升了44.5%（P＜0.05），78.3%（P＜0.05）和0.09%（P＜0.05）。30min与15min相比较，表达水平显著上升了23.4%（P＜0.05），60min与30min相比较下降了38.9%（P＜0.05），表达水平有明显变化，差别有统计学意义（P＜0.05）四结论：1外源性P物质可以促进创面愈合及瘢痕形成。2外源性P物质可以促进成纤维细胞增殖，且有一定的浓度依赖性，即随SP浓度的增高，促进成纤维细胞增殖的能力越强。3外源性P物质作用于成纤维细胞时，与短时间内活化FAK、PKB、NF-κB蛋白有关。4外源性P物质促进成纤维细胞增殖可能与整合素介导的FAK途径，磷脂酰肌醇232激酶（phosphatedylinositol232kinase,PI3K）途径、核因子途径有关。