【摘 要】
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目的:胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,早期诊断率低,晚期预后差。SAMD4A是一种转录后调节因子,已有研究证明其参与乳腺癌、口腔癌、结直肠癌及骨肉瘤的发生发展,但目前在胃癌中尚无研究报道。因此,本文选SAMD4A为研究对象,旨在首次探究SAMD4A在胃腺癌中的表达水平及临床意义。方法:利用基因芯片技术筛选出在胃腺癌、胃印戒细胞癌及癌旁组织中表达差异最明显的基因SAMD4A。收集青岛大学附属烟台毓璜
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目的:胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,早期诊断率低,晚期预后差。SAMD4A是一种转录后调节因子,已有研究证明其参与乳腺癌、口腔癌、结直肠癌及骨肉瘤的发生发展,但目前在胃癌中尚无研究报道。因此,本文选SAMD4A为研究对象,旨在首次探究SAMD4A在胃腺癌中的表达水平及临床意义。方法:利用基因芯片技术筛选出在胃腺癌、胃印戒细胞癌及癌旁组织中表达差异最明显的基因SAMD4A。收集青岛大学附属烟台毓璜顶医院2020-02至2020-06入院的60例行手术治疗且病理类型为胃腺癌的患者组织标本,采用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-Time Polymer Chain Reaction,q RT-PCR）和免疫蛋白印迹（Western blot,WB）技术分别检测癌与癌旁组织中SAMD4A mRNA和蛋白质表达水平,并分析与临床病理特征的关系。回顾性选用烟台毓璜顶医院胃腺癌标本库内2016-03至2016-08入库的60例癌及癌旁组织病理切片,收集其临床病理学资料。应用免疫组织化学染色技术（Immunohistochemical Staining,IHC）检测SAMD4A在两组样本中的表达水平,同时分析其表达水平与临床病理学特征之间的关系。应用GEPIA数据库分析SAMD4A表达水平与总生存期之间的关系。通过构建SAMD4A敲减细胞系以观察SAMD4A是否影响AGS、MKN45细胞的增殖、侵袭及迁移能力。结果:1.人类基因芯片检测结果表明:SAMD4A在胃腺癌及胃印戒细胞癌中表达均上调。其中SAMD4A在胃腺癌中差异更明显。胃腺癌内SAMD4A的表达水平是癌旁组织的4.16倍。2.qRT-PCR结果表明:在癌旁组织中SAMD4A mRNA表达水平（1.202±0.683）低于胃腺癌组织（2.076±1.124）,差异有统计学意义（P＜0.0001）。且SAMD4A的表达水平与肿瘤浸润深度有关（χ~2=5.192,P=0.023）。3.Western blot实验表明:胃腺癌组织中SAMD4A表达量（0.912±0.723）明显高于癌旁组织（0.724±0.479）,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。且SAMD4A的表达水平与肿瘤浸润深度有关（χ~2=4.239,P=0.040）。4.免疫组织化学分析显示,在癌旁组织中,SAMD4A的阳性表达率为43.3%（26/60）,胃腺癌中为65.0%（39/60）,两者表达差异有统计学意义（χ~2=5.673,P＜0.05）。5.单因素分析表明:SAMD4A与浸润深度（χ~2=11.774,P=0.001）、p TNM分期（χ~2=12.702,P=0.002）和有无淋巴结转移（χ~2=10.231,P=0.017）有关,而与年龄、性别、肿瘤最大直径、肿瘤部位、分化程度、Lauren分型及脉管癌栓无相关性。二元Logistic回归分析表明肿瘤浸润深度是SAMD4A表达水平的独立影响因素（P＜0.05）。6.GEPIA数据库内生存分析结果表明,SAMD4A表达阳性的胃腺癌患者总生存期低于阴性组患者,差异有统计学意义（P＜0.05）。7.建立SAMD4A敲减细胞系。CCK8增殖实验及克隆实验结果表明,敲减SAMD4A后细胞增殖速度较对照组大幅度下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。Transwell实验表明SAMD4A敲减组侵袭及迁移能力均较对照组减弱,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:本研究首次发现在胃腺癌组织中SAMD4A表达水平高于癌旁组织,且SAMD4A的表达水平与有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度、p TNM分期相关。肿瘤浸润深度更是SAMD4A表达水平的独立影响因素。GEPIA数据库分析显示相较于SAMD4A表达阴性的胃腺癌患者,SAMD4A表达阳性患者生存时间更短。体外实验表明,SAMD4A与胃腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力有关。这预示SAMD4A在胃腺癌发生、发展过程中发挥重要作用,有望成为胃癌诊断和评估预后的有效指标。
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