【摘 要】
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目的观察丹参花有效部位（DSH-20）对过氧化氢（H2O2）诱导H9c2心肌细胞氧化损保护作用并探讨其作用机制。方法1、DSH-20对H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤保护作用（1）制备H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤模型;筛选DSH-20最佳干预浓度。（2）将细胞分为空白、H2O2、H2O2+DSH-20组,H2O2组200 μM H2O2干预6 h,H2O2+DSH-20组DSH-20干
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目的观察丹参花有效部位（DSH-20）对过氧化氢（H2O2）诱导H9c2心肌细胞氧化损保护作用并探讨其作用机制。方法1、DSH-20对H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤保护作用（1）制备H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤模型;筛选DSH-20最佳干预浓度。（2）将细胞分为空白、H2O2、H2O2+DSH-20组,H2O2组200 μM H2O2干预6 h,H2O2+DSH-20组DSH-20干预48 h后200 μM H2O2干预6 h,空白组不处理。（3）CCK-8法检测H9c2心肌细胞活性;生化法检测ROS、SOD、LDH水平;流式细胞术检测H9c2心肌细胞凋亡率,q RT-PCR检测H9c2心肌细胞Bax、Caspase-3和Bcl-2表达水平。2、DSH-20抗H2O2诱导H9c2心肌细胞氧化损作用与miR-1相关性（1）miR-1模拟物转染心肌细胞。（2）细胞分为空白组、H2O2组、H2O2+DSH-20组、H2O2+miR-1 mimic组、H2O2+DSH-20+miR-1 mimic组。H2O2组200 μM H2O2干预6 h,H2O2+DSH-20组用DSH-20干预48 h后200 μM H2O2干预6 h;H2O2+miR-1 mimic组转染miR-1 mimic后200 μM H2O2干预6 h;H2O2+DSH-20+miR-1 mimic组转染miR-1 mimic后DSH-20干预48 h,最后200 μM H2O2干预6 h;空白组不予处理。（3）q RT-PCR检测miR-1表达水平;生化法检测H9c2心肌细胞ROS、SOD、LDH水平;流式细胞术检测H9c2心肌细胞凋亡率。结果1、与对照组比较,H2O2组ROS、LDH表达量及细胞凋亡率明显升高,SOD表达量明显降低（P<0.01或P<0.05）;与H2O2组比较,DSH-20组ROS、LDH表达量及细胞凋亡率明显降低,SOD表达量明显升高（P<0.01或P<0.05）;同时发现,与对照组比较,H2O2组Bax、Caspase-3表达水平明升高,Bcl-2表达水平明显降低（P<0.01或P<0.05）,与H2O2组比较,DSH-20组Bax、Caspase-3表达水平明显降低,Bcl-2表达水平明显升高（P<0.01或P<0.05）。2、与对照组比较,H2O2组miR-1表达水平明显升高（P<0.01或P<0.05）;与H2O2组比较,DSH-20组miR-1表达水平明显降低（P<0.01或P<0.05）;转染miR-1模拟物后,与H2O2组比较,H2O2+miR-1 mimic组ROS、LDH表达量明显升高,SOD表达量明显降低（P<0.05或P<0.01）;与H2O2+DSH-20组比较,H2O2+DSH-20+miR-1 mimic组ROS、LDH表达量明显升高,SOD表达量明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论1、DSH-20显著改善H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化损伤。2、DSH-20可能通过调节miR-1表达水平减轻H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化损伤。
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