复合含糖聚合物的可控自由基合成及其与细菌和细胞作用的研究

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近年来,活性/可控自由基聚合的发展已经能达到对所合成含糖聚合物的链段结构及糖分子的空间分布的控制,越来越多组成结构各异的复合含糖聚合物得以被制备出来,相关生命科学领域也因此有了许多新的应用进展。含糖聚合物通过加入不同性质的单体进行共聚所得到的复合含糖聚合物因聚合链的组分及拓扑结构的差异可为其带来许多性质上的差异性。通过活性/可控自由基聚合得到的组成不同,结构各异的复合含糖聚合物在同细菌及细胞作用时所表现出的特性也使得复合含糖聚合物在生物领域得到了许多的应用。本论文以可控自由基聚合为制备手段,通过与新型技术高通量的结合以及与合成反应点击化学相结合,制备出了具有不同配比或不同拓扑结构的复合含糖聚合物,并对其与细菌及细胞的相互作用进行研究。研究内容主要分为以下两个部分:(1)我们将敞口光聚合方法与高通量实验技术相结合,在敞口的96孔板中合成出一系列不同组成的复合含糖聚合物,并筛选出具有低细胞毒性和高抗菌性能的聚合物。聚合通过ROS-RAFT聚合方法在模拟太阳光催化下进行,得到的聚合物通过GPC和NMR进行表征,证明得到了可控性良好的复合含糖聚合物。通过浊度法对所合成的一系列含糖聚合物与大肠杆菌黏附能力进行测试,并使用涂板法对其杀菌能力进行测试,筛选出12种杀菌能力在85%以上的复合含糖聚合物。接下来,我们以L929为模型细胞,对所筛选出的具有较强杀菌能力的聚合物进行细胞毒性测试,得到的两组聚合物在拥有较强杀菌性能的同时,细胞存活率分别为98%和87%,我们认为这两组复合含糖聚合物达到了低毒性和高杀菌性能的平衡。(2)本实验通过RAFT聚合同点击化学相结合,合成了两种不同结构的含胆固醇单体及半乳糖单体的嵌段复合含糖聚合物,一种为线形复合含糖聚合物分子,另一种为与线形分子组成相同,具有环状拓扑结构的聚合物。首先,通过核磁,GPC,FT-IR等手段对所得到的聚合物进行表征,证明得到了控制性良好目标产物。对得到的复合含糖聚合物进行自组装得到稳定的组装体溶液,并使用SEM,AFM,DLS等测试手段,对所得到的组装体的形貌进行表征。得到的结果表明,线形聚合物的组装体尺寸小于环形,且粒径分布较为均匀。对两种组装体的包载测试及与细菌及细胞的黏附实验表明,相对于线形结构的聚合物,环状聚合物组装体对小分子模型尼罗红有更好的包载能力,对细菌具有更好的黏附性能。在与细胞作用时,二者停留在细胞表面的时间接近,但在研究特异性蛋白与细胞作用情况时,加入线形复合含糖聚合物组装体使蛋白停留在细胞表面的时间更长。
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