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目的:通过对哮喘模型小鼠舌下含服尘螨疫苗进行治疗,研究治疗前后树突状细胞和NF-κB在颌下淋巴结和肺部的变化,比较高剂量疫苗和低剂量疫苗对哮喘小鼠的疗效。探讨舌下含服粉尘螨疫苗治疗哮喘的机制。方法:1、28只4～6周龄SPF级Bal/c小鼠分成正常对照组、哮喘模型组、高剂量粉尘螨疫苗治疗组和低剂量粉尘螨疫苗治疗组。正常对照组不做处理,其余组在0,7,14天用粉尘螨变应原粗浸液50μg+2mg Al(OH)3致敏,第28天小鼠麻醉状态下行舌下含服疫苗治疗(疫苗在小鼠舌下停留2分钟)分别给予:PBS,高剂量粉尘螨疫苗(1mg)和低剂量粉尘螨疫苗(100μg),每次间隔一天,共18次。完成免疫后1周,用50μg Der f1变应原滴鼻激发,每天一次,连续7次。末次激发后一天,进行气道高反应性的检测,四组小鼠均分别先用PBS测基础Penh值,然后依次以1mg/ml、10mg/ml、30mg/ml、50mg/ml、100mg/ml乙酰甲胆碱激发,观察Penh值的变化。2、末次激发后二天,各组小鼠麻醉后,用冷磷酸盐缓冲液(PBS) 500μl进行支气管肺泡灌洗(BAL),反复抽吸3次,然后回收支气管肺泡灌洗液(BALF),并记录回收量,用刘氏染色液染色,计数200个细胞,进行细胞分类计数。3、末次激发后第三天各组小鼠在麻醉后取颌下淋巴结和肺组织,采用免疫组织化学双染色法对颌下淋巴结树突状细胞和肺组织内的NF-κB染色定位,在光学显微镜下观察并用体视学测量它们的体密度、数密度以及表面积密度。结果:1、哮喘模型组小鼠激发后可见咳嗽、喘息、呼吸加深加快,烦躁不安。高剂量治疗组激发后也可见类似症状和体征,但表现明显减轻。2、正常组小鼠颌下淋巴结内的33D1阳性细胞数密度(2.03±0.52)×10-3μm-3、体积密度(2.75±1.33)×10-3μm0、表面积密度(2.32±1.20)×10-3μm-1;哮喘模型组数密度(14.88±3.04)×10-3μm-3、体积密度(23.99±5.09)×10-3μm0、表面积密度(22.06±1.67)×10-3μm-1;高剂量治疗组数密度(2.52±0.90)×10-3μm-3、体积密度(4.32±1.34)×10-3μm0、表面积密度(3.17±0.85)×10-3μm-1;高剂量治疗组各参数与模型组比较(P<0.01)有显著差异,模型组与正常组比(P<0.05)有统计学意义;3、正常组小鼠肺组织NF-κB阳性细胞数密度(3.02±0.26)×10-3μm-3、体积密度(4.88±1.02)×10-3μm0、表面积密度(3.86±0.95)10-3μm-1;哮喘模型组数密度(70.46±2.37)×10-3μm-3、体积密度(88.26±1.73)×10-3μm0、表面积密度(86.03±1.48)10-3μm-1;高剂量治疗组数密度(10.68±1.39)×10-3μm-3、体积密度(14.30±1.09)×10-3μm0、表面积密度(14.02±0.51)10-3μm-1;高剂量治疗组各参数与模型组比较有显著差异(P<0.01),模型组与正常组比较有统计学意义(P<0.01);低剂量治疗组与模型组比较没有统计学意义(P﹥0.05)。4、哮喘模型组小鼠肺泡灌洗液细胞总数(79.05±11.58)、嗜酸性粒细胞数(17.63±4.98);高剂量治疗组细胞总数(37.99±5.27)、嗜酸性粒细胞数(3.80±0.67);低剂量治疗组细胞总数(63.06±11.66)、嗜酸性粒细胞数(17.43±2.87)。哮喘小鼠在高剂量疫苗治疗后肺泡灌洗液细胞总数和嗜酸性粒细胞都有所下降,高剂量治疗组与模型组比较有显著差异(P<0.01),低剂量治疗组与模型组比较没有统计学意义(P>0.05)。5、高剂量治疗组小鼠比模型组气道高反应性降低,而低剂量治疗组与模型组比较差异不大。结论:1、舌下含服粉尘螨疫苗治疗哮喘小鼠有效,累积剂量为900μg Der f1/18mg总蛋白的舌下含服粉尘螨疫苗对小鼠过敏性哮喘具有治疗效果。2、舌下含服粉尘螨疫苗治疗哮喘小鼠的治疗机制与树突状细胞的免疫耐受和NF-κB的下调有关。