【摘 要】
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目的:应用RNAi技术下调SOCS1基因表达联合OK432刺激成熟的树突状细胞(dendritic cell,DC)体外诱导特异性抗肿瘤作用,初步探讨其作用机制。 材料和方法:利用特异性的siRNA下调
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目的:应用RNAi技术下调SOCS1基因表达联合OK432刺激成熟的树突状细胞(dendritic cell,DC)体外诱导特异性抗肿瘤作用,初步探讨其作用机制。
材料和方法:利用特异性的siRNA下调DC中SOCS1的表达,同时用肝癌细胞裂解物和凋亡肝癌细胞负载DC细胞,OK432刺激DC成熟,观察DC的形态特征,流式细胞仪检测刺激前后DC的表型变化,以及IFN-γ分泌,奥马兰(AlamarBlue)法检测成熟DC对自身淋巴细胞的激活和增殖作用,LDH法检测其对不同来源肿瘤细胞的杀伤作用。
结果:DC体外诱导培养成功,设计的siRNA片段能有效下调DC中SOCS1的表达,OK432刺激DC细胞成熟,DC细胞的表面抗原:CD80、CD83、CD86、HLA-DR等明显上调表达,而负载肝癌抗原对DC表型无明显影响;SOCS1的下调可以促进DC的成熟,负载肝癌抗原的DC细胞能有效刺激自体淋巴细胞的增殖,同时产生针对同种肝癌细胞的特异性杀伤作用。
结论:RNAi干扰下调SOCS1表达,OK4.32刺激成熟同时负载肝癌全细胞抗原的DC细胞可以产生高效而特异性的抗肝癌的免疫应答,为临床提供一种增强抗肝癌DC疫苗免疫应答的新途径,同时为临床制备更有效,更特异的DC抗肝癌疫苗奠定基础。
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