不同分子质量海参糖胺聚糖联合光动力疗法对人肺腺癌A549细胞增殖抑制和凋亡的影响

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目的探究不同分子质量海参糖胺聚糖(HGAG)联合血卟啉衍生物介导的光动力疗法(HPD-PDT)对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制和促凋亡的影响,为探索肺癌新的临床治疗手段提供理论支持。方法选取人肺腺癌A549细胞为研究对象,通过体外培养至合适程度,对其进行分组,对照组(细胞+培养液,无其他处理)、3W分子质量海参糖胺聚糖组(3W分子质量海参糖胺聚糖浓度为100μg/ml)、5W分子质量海参糖胺聚糖组(5W分子质量海参糖胺聚糖浓度为100μg/ml)、光动力组(血卟啉衍生物浓度8μg/ml并经630nm激光照射)、3W分子质量海参糖胺聚糖联合光动力组(100μg/ml的3W分子质量海参糖胺聚糖联合8μg/ml的血卟啉衍生物并经630nm激光照射),5W分子质量海参糖胺聚糖联合光动力组(100μg/ml的5W分子质量海参糖胺聚糖联合8μg/ml的血卟啉衍生物并经630nm激光照射),处理完毕后继续对各组细胞进行培养,检测并收集数据:(1)显微镜下观察各组细胞形态学变化;(2)通过CCK-8实验测定各组细胞存活率以及计算相互作用系数(CDI);(3)通过Hoechst 33258染色剂对各组进行染色,并运用荧光显微镜观察;(4)通过Annexin V-FITC/PI双染法对各组染色,并使用流式细胞仪检测凋亡率。结果(1)光镜下可见各实验组经相应处理后,细胞数较对照组降低,分布较其稀疏,细胞间隙明显增大,部分细胞漂浮于培养液表面,其中两个联合组最为明显;(2)CCK-8法检测实验结果显示,HGAG和HPD-PDT单独使用均可对细胞增殖产生抑制作用,而且HGAG可以增强HPD-PDT的效果。两个联合组与单独用药组相比,抑制效果更为明显;(3)Hochest 33258染色实验示:对照组未见明显凋亡细胞,仅少数细胞被染为淡蓝色,各实验组在镜下均能观察到部分细胞出现核固缩乃至核碎裂现象,凋亡细胞较正常细胞体积变小,胞核颜色略发白,两个联合组凋亡细胞数明显高于其他实验组,而且细胞密集程度明显降低;(4)流式细胞术检测显示:各组总凋亡率依次为(6.179±0.374)%、(12.783±1.786)%、(10.834±2.897)%、(14.994±1.326)%、(34.410±5.761)%、(27.231±3.336)%。3W HGAG组凋亡率明显高于5W HGAG组,其中两个联合组凋亡率最高。组间对比差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论两种分子质量海参糖胺聚糖以及光动力疗法单用或联用均对人肺腺癌A549细胞的生长、增殖具有明显抑制作用并且可以促进其凋亡,二者都可以增强A549细胞对光动力治疗的敏感性,其中3W分子质量海参糖胺聚糖效果更佳。
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