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目的:优化推拿<扌衮>法操作行气活血效应的动力学参数;动态观察最佳动力学参数<扌衮>法的行气活血效应;探索<扌衮>法行气活血效应的信号转导途径。
方法:实验分三部分进行。
<扌衮>法动力学参数优化部分:循环应用正交试验设计方法,选择岳阳中西医结合医院的实习生、研究生、进修医师、青年医生中20~40岁健康男性志愿者162例为研究对象,<扌衮>法施术于受试者左下肢腓肠肌处,<扌衮>法前后采用彩色超声多普勒诊断系统测量腘动脉血流量(Volume Flow,VF),对<扌衮>法动力学参数--力量、频率、时间进行三因素三水平的正交试验。经过三次循环实验,以VF增益率为指标,优化筛选出推拿<扌衮>法操作行气活血效应的最佳动力学参数组合模型。
<扌衮>法行气活血效应动态观察部分:选择自2006年3月至7月岳阳中西医结合医院心内科及老年科冠心病男性患者20例,健康男性志愿者20例作为研究对象,在前期优化筛选的最佳动力学参数组合模型中,选择动力学参数组合为力量4kg、频率120次/分、时间10min的<扌衮>法,施术于研究对象的左下肢腓肠肌处,在<扌衮>法前、<扌衮>法后即刻、5min、10min、15min、20min时,采用彩色超声多普勒诊断系统测量腘动脉VF值,计算VF增益率,对两组<扌衮>法前后的VF增益率进行统计学分析。
<扌衮>法行气活血效应机制实验部分:采用细胞培养技术,培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立缺氧细胞模型,将正常细胞和缺氧细胞分别分为对照组、推拿组、推拿+维拉帕米组。各组细胞进行相应处理后,分别对细胞内Ca<2+>浓度、eNOSmRNA水平和NO含量进行检测。
结果:推拿<扌衮>法操作的动力学参数中,以力量3.5~4.5公斤、频率105~135次/分、时间8.75~11.25分钟范围内的进行组合时,提高腘动脉血流量增益率的效果最为显著。以最佳动力学参数<扌衮>法对健康志愿者组和冠心病患者组进行推拿后,两实验组的VF增益率在<扌衮>法前后的变化趋势基本相同,<扌衮>法后15分钟内都有不同程度的显著升高,20分钟时基本恢复到推拿前水平,且组间对应的各动态观察点VF增益率比较没有差异性。HUVEC在掖法机械刺激作用下,细胞内eNOSmRNA表达水平、NO的合成和释放、Ca<2+>浓度都有显著增加,但加入钙离子拮抗剂维拉帕米后,各项指标均无显著性变化。
结论:不同动力学参数组合的<扌衮>法提高血流动力学水平的程度不同;以力量3.5~4.5公斤、频率105~135次/分、时间8.75~11.25分钟范围内组合的<扌衮>法为行气活血的最佳动力学参数;盲目加大<扌衮>法力量,提高手法频率,延长治疗时间,并不能提高治疗效应。<扌衮>法行气活血效应是通过增加动脉血流量,提高血流动力学水平来实现的;此效应在推拿后即刻就能产生并逐渐增强,随时间的延长又逐渐消失;<扌衮>法行气活血效应不因个体差异而不同,也不因血流动力学基础水平的不同而有差异。掖法的行气活血效应机制是通过机械信号刺激血管内皮细胞的Ca<2+>通道开放,引起Ca<2+>内流,进而导致细胞内eNOSmRNA表达增强、NO的合成和释放增加,引起血管舒张,血流量增大,达到行气活血的生物学效应。