高产生物表面活性剂菌株的提纯与选育

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生物表面活性剂是微生物代谢产生的一类具有表面活性的两性物质。它能够降低界面张力、无毒、可生物降解、具有良好的乳化性能,其所具有的环境兼容性是化学合成表面活性剂所无法比拟的,在各个领域中都有广泛的应用,尤其在环境保护和石油开采方面发挥着巨大作用。本论文的研究内容主要包括高产生物表面活性剂菌株的筛选,菌株发酵条件的优化及所产生物表面活性剂性质的初步探究。本研究从长期被石油污染的土壤中取样,通过富集、提取和纯化等步骤进行初筛得到单一菌株,通过表面张力法、排油圈法、溶血圈法对所得到的菌株进行复筛,最终得到4株相对高产生物表面活性剂的菌株,其编号分别为64、89、109、112。分别对这4株菌株利用单因素实验方法进行了发酵条件的优化。优化结果为:64号菌株的最佳碳源为植物油,最佳氮源为酵母粉和牛肉膏,最适温度为30℃,最适pH为8,最佳盐度为0.5%-2%,最适装液量为30mL;89号菌株的最佳碳源为石蜡,最佳氮源为酵母粉,最适温度为30℃,最适pH为7.3,最适盐度为0.5%-2%,最适装液量为25mL;109号菌株的最佳碳源为植物油,最佳氮源为酵母粉和牛肉膏,最适温度为30℃,最适pH为7.3,最适盐度为0.5%-1%,最适装液量为35mL;112号菌株的最佳碳源为石蜡,最佳氮源酵母粉和牛肉膏,最适温度为20℃,最适pH为7.3,最适盐度为0.5%-1%,最适装液量为30mL。分别对这4株菌株产生的生物表面活性剂进行了乳化性测试,并通过亚甲基蓝-氯仿实验进行离子类型分析,通过薄层层析实验进行物质成分分析。结果表明,这4株菌株的乳化体积均在80%以上,并且乳化性能比较稳定,产生的生物表面活性剂均是阴离子型、糖脂类物质。
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