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目的:探讨NLR家族含CARD结构蛋白3(NLR family CARD-containing 3,NLRC3)对肝缺血再灌注体外模型RAW264.7细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)炎性反应的影响,明确NLRC3减轻RAW264.7细胞H/R炎性反应的具体分子机制。方法:建立小鼠肝脏缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型,采用Western blot技术检测肝组织NLRC3蛋白表达以及ELISA技术检测血清IL-1β水平;建立RAW264.7细胞H/R体外模型,Western blot法检测RAW264.7细胞中NLRC3、TRAF6及其K63泛素化、NF-κB p65亚基、磷酸化p65(p-p65)、IκBα的蛋白水平;采用Co-IP技术检测RAW264.7细胞内NLRC3和TRAF6蛋白的生理性相互结合;运用细胞免疫荧光技术检测RAW264.7细胞中NF-κB p65亚基入核水平;采用ELISA技术检测细胞培养液中IL-1β的含量。结果:在小鼠肝脏I/R模型中,随再灌注时间延长,血清IL-1β含量增高(P<0.05),NLRC3蛋白在肝组织中的表达降低(P<0.05);在RAW264.7细胞H/R体外模型中,NLRC3、IκBα蛋白表达随复氧时间增加而降低,而p-p65/p65、TRAF6蛋白及其K63泛素化水平则与之相反(P<0.05);Co-IP结果表明NLRC3与TRAF6之间存在生理性相互结合;过表达NLRC3对TRAF6蛋白的组成性表达无显著影响(P>0.05),但能明显降低H/R细胞模型中TRAF6-K63泛素化、p-p65/p65蛋白水平,上调IκBα表达(P<0.05);过表达NLRC3显著抑制NF-κB p65亚基激活核转运水平(P<0.05),细胞培养液中IL-1β的含量也明显降低(P<0.05)。结论:在小鼠肝脏I/R和RAW264.7细胞H/R模型中,NLRC3的蛋白表达随再灌注/复氧时间延长而降低。过表达NLRC3对H/R炎症模型中促炎因子的释放产生显著抑制作用,其可能机制为通过降低TRAF6-K63泛素化水平抑制NF-κB信号通路活化从而减轻细胞炎症反应。