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目的: 使用高通量测序技术检测地中海贫血基因,并以多重缺口PCR技术为补充,建立新的筛查模式,探讨该模式的临床应用价值;研究佛山区的地中海贫血基因突变类型及其分布特征,进一步阐述各种突变类型的病理分子机制。 方法: 对受试者进行血常规、血红蛋白电泳、Gap-PCR和高通量测序检测,并通过RDB-PCR技术和Sanger测序技术分别对常见的和非常见的地中海突变类型进行验证。 结果: (1)高通量测序技术在地中海贫血诊断中的符合率为99.87%;(2)1514例样本中,发现25个SNP位点和46种地贫基因变异,共构成57种地贫基因型;共有157例(10.37%,157/1514)样本携带6种常见的α地贫基因型(SEA型、4.2型、3.7型、CS型、QS型、WS型);共有36例(2.38%,36/1514)样本携带6种常见的β地贫基因:CD41/42(-TCTT)、IVS-Ⅱ-654(C>T)、CD71/72(+A)、CD17(A>T)、-28(A>G)、-29(A>G)、Cap+40-43(-AAAC);共发现7种异常Hb:包括Hb Woodville、Hb Hekinan、Hb Q-Thailand、Hb Owari、Hb New York、Hb Hamilton、Hb CervantesⅡ;发现2例稀有β+地贫突变:β-50G>A和β+8(C→T);2种α基因转换:HBA1:c.301-31_301-24delCTCGGCCC insG、HBA2:c.301-24delGins CTCGGCCC。除上述突变外,新发现的1例β-63A>G(HBB:c.-113A>G)血红蛋白电泳结果异常,可能为新发突变,其余20种突变,未发现文献报道,其血常规和血红蛋白电泳均无异常;(3)通过MCV/MCH、HbA2逐步进行筛查,α地贫的漏检率高达4.62%。 结论: 佛山地区地贫基因突变类型丰富,具有明显的遗传异质性,可能存在新发突变;高通量测序技术联合Gap-PCR技术可作为血红蛋白病的一线筛查方案。