罗格列酮对脓毒症大鼠急性肺损伤保护作用的研究

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目的本实验通过建立脓毒症(sepsis)模型,观察过氧化物酶增殖物激活受体(Peroxisome proliferator activated receptor,PPAR)的激动剂罗格列酮对脓毒症所致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响,探讨其对脓毒症所致ALI的保护作用及其可能的作用机制,从而为临床上ALI的治疗提供理论依据。方法采用腹腔注射内毒素(lipopolysaccharides,LPS)的方法制备脓毒症ALI的动物模型。将54只雄性SD大鼠随机均分为对照组(C组),脓毒症组(L组),罗格列酮治疗组(T组),各组分别于造模成功后3 h,6h和12h三个时相点各处死6只,留取肺组织标本,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各时相点血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6的(IL-6)含量;蛋白质印迹法(Western-blot)检测血红素加氧酶(Heme Oxygenase-1,HO-1)的蛋白质水平;计算肺湿/干重(wet to dry weight,W/D)比值;光镜下观察各组大鼠肺组织的病理学改变。多组间差异比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD法。结果1.一般情况:L组大鼠于腹腔注射LPS后逐渐出现摄食减少、活动减少、呼吸频率加快、精神萎靡、竖毛、嗜睡等症状,并随着时间的延长而上述症状加重。T组大鼠较L组进食及活动增多、嗜睡等精神状态明显好转。2.大鼠肺组织病理变化:L组大鼠肉眼观:肺脏体积增大,表面有淤血,可见米粒大小的出血点以及水肿。光镜下:可见不同程度的炎性细胞浸润,肺泡萎陷,肺泡间隔中度增宽以及肺间质及肺泡腔内见灶性出血。T组各时间点较L组好转。3.肺湿干重比(W/D)L组肺湿/干重比各时间点较C组明显上升,且L组组内各时间点两两比较具有显著性差异(P<0.01)。T组肺湿/干重比在6h及12h两个时间点较L组显著降低(P<0.01),且T组组内肺湿/干重比于3h、6h逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05)。4.血清TNF-α以及IL-6水平:L组大鼠血清TNF-α水平各时间点显著高于C组(P<0.05),且L组组内各时间点两两比较具有显著性差异(P<0.05),呈动态下降趋势。T组6h,12h显著低于L组(P<0.01);L组大鼠血清IL-6水平于3h达到高峰,且L组组内各时间点两两比较具有显著性差异(P<0.01),呈动态下降趋势。T组大鼠血清IL-6水平各时间点均小于L组(P<0.05)。5.大鼠肺组织HO-1蛋白表达情况:与C组比较,L组大鼠肺组织HO-1蛋白表达于6h及12h显著上升(P<0.01),且L组组内比较6h及12h均较3h明显上升(P<0.01)。T组各时间点与L组相比显著上升(P<0.01),且T组组内比较,各时间点大鼠肺组织HO-1蛋白表达两两比较均有显著差异(P<0.01),呈动态升高趋势。结论预先给予罗格列酮可以对脓毒症大鼠急性肺损伤起保护作用,其机制可能与提高肺组织HO-1蛋白表达,减轻脓毒症大鼠的炎症反应有关。
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