【摘 要】
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目的 研究中波紫外线(UVB)辐射对表皮角质形成细胞核因子κB(NF-κB)和P53信号通路的影响以及NF-κB和P53信号通路的交互作用.方法 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)(含野生型p5
【机 构】
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杭州市第三医院皮肤科,南京医科大学第一附属医院皮肤科,南京医科大学第一附属医院中心实验室
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目的 研究中波紫外线(UVB)辐射对表皮角质形成细胞核因子κB(NF-κB)和P53信号通路的影响以及NF-κB和P53信号通路的交互作用.方法 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)(含野生型p53)和永生化人角质形成细胞株HaCaT(含突变型p53)各分2组于37℃、5%CO2环境培养.当细胞融合达85%时进行UVB(60mJ/cm2)辐射,其中1组于辐射前1 h加入终浓度为5μmol/L具有抗NF-κB活化作用的BAY11-7082.分别提取辐射前后NHEK和HaCaT细胞蛋白和核蛋白,应用Western印迹检测NF-κB、P53和P21蛋白的表达水平,应用电泳迁移变更分析(EMSA)检测NF-κB的转录情况.结果 UVB辐射可激活NHEK和HaCaT的NF-κB、P53和P21的蛋白表达和NF-κB的转录活性.BAY11-7082对NHEK和HaCaT的NF-κB的转录活性均具有显著的抑制作用.作为NF-κB的抑制剂,BAY11-7082还显著抑制了NHEK的P53和P21的蛋白表达(P53:0.08±0.07vs 0.78±0.32,P＜0.01;P21:0.65±0.22 vs 1.58±0.77,P＜0.05),但不影响HaCaT的P53和P21的蛋白表达.结论 UVB辐射激活表皮角质形成细胞的NF-κB和P53信号通路存在交互作用,这种交互作用与P53功能状况相关.
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