含GDNF基因的慢病毒载体的构建和其在人胚胎神经干细胞中的表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pocohao

【摘要】

：

利用含胶质源性神经营养因子（Glial cell derived neurotrophic factor,GDNF）基因的慢病毒载体转染了人胚胎来源的神经干细胞，探讨了转染后GDNF在神经干细胞中的体外表达水平及

【作者】

：

王淑艳任萍谢淑朱宛宛王暘关云谦张愚

【机构】

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首都医科大学宣武医院细胞治疗中心,国家人类基因组北方研究中心

【出处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2008年12期

【关键词】

：

胶质源性神经营养因子神经干细胞慢病毒载体转染 GDNF neural stem cells lentiviral vectors transduct

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（No.3042801040）,国家重点基础研究计划（No.2006CB943703）,北京市科委科技计划（No.D07050701350703）资助.

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利用含胶质源性神经营养因子（Glial cell derived neurotrophic factor,GDNF）基因的慢病毒载体转染了人胚胎来源的神经干细胞，探讨了转染后GDNF在神经干细胞中的体外表达水平及其影响因素。首先GDNF基因被克隆入慢病毒载体，通过瞬时转染法包装出病毒上清，经滴度鉴定后分别按拷贝数为1、2．5、5、10转染神经干细胞。转染后细胞经过潮霉素筛选得到均一表达GDNF的神经干细胞体系。其后分别利用酶联免疫吸附（ELISA）方法和Real-time PCR方法测定不同转染组细胞在不

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