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目的 对柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)毒株进行分离、鉴定,并分析其生物学特性,为CA16疫苗候选毒株的筛选奠定基础.方法 从手足口病患者的咽拭子或疱疹液样本中分离CA16毒株,经噬斑纯化后,用逆转录-聚合酶链反应进行病毒鉴定.将病毒连续传代后,对其VP1基因进行序列测定,分析VP1基因和氨基酸序列的同源性和遗传稳定性.结果 通过Vero细胞适应传代和噬斑纯化,获得遗传稳定的CA16毒株,感染Vero细胞后引起典型的细胞病变.病毒分离株经CA16特异性引物扩增后可见208 bp的特异性条带,经VP1基因测序进一步确定这些分离株为CA16.同源性和系统进化树分析表明,各毒株与shzh04-J31株的同源性最高,为92.4％～96.1％,均属于C基因亚型.病毒分离株在Vero细胞上连续传12代后,仅1株病毒的1个氨基酸发生改变.结论 成功分离到CA16毒株,其生物学特性稳定,可用于CA 16疫苗的研发。