人源His—talin1原核表达载体的构建及其蛋白表达

来源 :解剖学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woai894781693
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目的克隆人源talinl cDNA,构建其高效原核表达载体,并纯化得到高纯度His-talinl融合蛋白。方法PCR法扩增talinl基因并连接到原核表达载体pET32a(+),筛选和测序鉴定阳性克隆。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达和亲和层析分离纯化表达产物,对纯化的蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果成功扩增了2.4kb的talinl基因,构建了pET32a(+)-talinl重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达出His—talinl融合蛋白。经SDS—
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