【摘 要】
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为研究棉花HSP70基因在转基因植物中抗旱效果,利用前期克隆的Gh HSP70基因,以p CAMBIA1304质粒为植物表达载体,构建了Gh HSP70基因的植物表达载体p CAMBIA1304-HSP70;采用冻
【机 构】
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新疆农业大学农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室,中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金地区科学基金项目“小麦非生物胁迫相关MYB转录因子TaSIM的功能及分子机理研究”(31360264);新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目“棉花干旱胁迫相关Hsp70基因的克隆及功能分析”(2014211A025);“棉花抗逆相关MYB转录因子的功能分析”(2013211B19);棉花生物学国家重点实验室开放课题“棉纤维品质相关MYB转录因子的功能分析”(CB2015A26)
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为研究棉花HSP70基因在转基因植物中抗旱效果,利用前期克隆的Gh HSP70基因,以p CAMBIA1304质粒为植物表达载体,构建了Gh HSP70基因的植物表达载体p CAMBIA1304-HSP70;采用冻融法转入根癌农杆菌EHA105菌株,通过叶盘法对模式植物烟草进行遗传转化研究。结果表明,在潮霉素(50 mg/L)选择压力下获得的烟草转化不定芽和完整植株,经过PCR方法以及GUS基因组织化学法检测鉴定转基因烟草,其中有5株为阳性植株。初步证实了Gh HSP70基因已导入烟草基因组中。为进一步研究该基因的功能提供实验基础,同时为后续转化棉花改善其抗旱能力奠定基础。
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