【摘 要】
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以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,研究了用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES cell)培养液中的胎牛血清(FBS)
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院,杨凌,712100农业部全国畜牧总站畜禽牧草种质资源保存利用中心,北京,100094;
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以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,研究了用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES cell)培养液中的胎牛血清(FBS)和向含KSR的基础培养液中添加40%的小鼠ES细胞条件培养液(ES cell conditioned medium,ESCCM)对绵羊类Es细胞分离、克隆效率的影响.发现使用含FBS的基础培养液最多可以把绵羊类ES细胞传至3代,而使用KSR和添加ESCCM能促进绵羊类ES细胞的分离和克隆.所获得的类ES细胞分别可稳定传至第5和8代.同时对类ES细胞进行核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的类Es细胞符合ES细胞的主要特征.由此认为.与FBS相比KSR更加适于绵羊类Es细胞的分离与培养;而小鼠ES细胞在生长过程中可能分泌某些重要的细胞因子,从而达到促进绵羊ES细胞增值的作用.
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